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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

[求助] 动物组织DNA提取 已有2人参与

急求动物组织DNA提取操作步骤及相关溶液配制方法。PS:下官是在尝试了两种种提取试剂盒之后,迫不得已选择这个方法的,各位大侠帮帮忙吧!
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by 轨未 at 2013-04-16 14:44:12
对于楼主尝试了两种试剂盒都失败,表示遗憾。
用的什么牌子的失败了呢。什么组织,肝脏?肌肉?
提DNA一般来说是最靠谱的吖,不会失败的吧。
说说你的操作处理,尤其是样品用什么保存的。说不定能发现失败的原因 ...

我提取的动物肌肉组织,实验操作都是按照试剂盒说明书进行的,只是最后溶解DNA时用的100μL ddH2O,4℃保存。DNA检测都是在提取出来之后就做的,用H2O也行的吧?
4楼2013-04-16 18:58:12
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 轨未 at 2013-04-16 18:59:19
肌肉组织是酒精保存的?
提取之前,研磨之后。酒精晾干了没有?...

是酒精保存的,研磨前晾干。这些操作方法提取另外一个物种时很顺利。换了一个物种就不行了。样品比较新鲜。。。
6楼2013-04-16 19:18:58
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 轨未 at 2013-04-16 19:21:37
另个物种很好。这个就没有。。。略诡异
检验的时候条带不亮,还是彻底没有。如果亮度不足也没关系。PCR没问题的...

检测基因组,无条带。PCR做的COI,28S也只有极少部分能出条带,可以进行测序。PCR条件是根据该物种相关文献做的。
8楼2013-04-16 19:27:22
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 诸葛小汐 at 2013-04-21 12:11:15
我提过哺乳动物血液和淡水贝类和螺类的…有时间我发你吧,留个邮箱

liuchunf@yeah.net,先谢过啦!
14楼2013-04-22 21:24:57
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