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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)

[求助] 动物组织DNA提取已有2人参与

急求动物组织DNA提取操作步骤及相关溶液配制方法。PS：下官是在尝试了两种种提取试剂盒之后，迫不得已选择这个方法的，各位大侠帮帮忙吧！
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1楼2013-04-16 14:36:31
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liyu0355

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
取0．2g左右的肌肉于2mL的玻璃匀浆器中，加人450μLSTE液匀浆，倒人1.5mL Ep 管， 加20％ SDS25μL，蛋白酶K(10mg／mL)25μL ，50oC消化过夜，酚、氯仿和异戊醇进行常规基因组DNA抽提 ，基因组DNA置4oC冰箱中保存备用。
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3楼2013-04-16 17:16:57
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轨未

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2013-04-16 16:46:16
对于楼主尝试了两种试剂盒都失败，表示遗憾。
用的什么牌子的失败了呢。什么组织，肝脏？肌肉？
提DNA一般来说是最靠谱的吖，不会失败的吧。
说说你的操作处理，尤其是样品用什么保存的。说不定能发现失败的原因。
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today is present
2楼2013-04-16 14:44:12
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hechuguiqu11

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 轨未 at 2013-04-16 14:44:12
对于楼主尝试了两种试剂盒都失败，表示遗憾。
用的什么牌子的失败了呢。什么组织，肝脏？肌肉？
提DNA一般来说是最靠谱的吖，不会失败的吧。
说说你的操作处理，尤其是样品用什么保存的。说不定能发现失败的原因 ...

我提取的动物肌肉组织，实验操作都是按照试剂盒说明书进行的，只是最后溶解DNA时用的100μL ddH2O，4℃保存。DNA检测都是在提取出来之后就做的，用H2O也行的吧？
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4楼2013-04-16 18:58:12
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轨未

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by hechuguiqu11 at 2013-04-16 18:58:12
我提取的动物肌肉组织，实验操作都是按照试剂盒说明书进行的，只是最后溶解DNA时用的100μL ddH2O，4℃保存。DNA检测都是在提取出来之后就做的，用H2O也行的吧？...

肌肉组织是酒精保存的？
提取之前，研磨之后。酒精晾干了没有？
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today is present
5楼2013-04-16 18:59:19
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