| 查看: 4764 | 回复: 13 | ||||
cuicchao金虫 (正式写手)
|
[求助]
毕赤酵母用于电转化制备感受态细胞步骤
|
|
毕赤酵母电转化： 介绍：该方法无需产生去壁细胞，是产生毕赤酵母重组子的简便方法。与去壁细胞效率 相似。 细胞准备： 1 在含5mlYPD 的50ml 离心管中，培养毕赤酵母，30 度过夜 2 取0.1-0.5ml 过夜培养物，接种含500ml 新鲜培养基的2L 摇瓶，过夜生长至OD600 ＝1.3-1.5 3 在4 度，1500g离心5min收集细胞,用500ml预冷的灭菌水悬浮细胞 4 如上离心，用250 ml预冷的灭菌水悬浮细胞 5 如上离心，用20ml预冷的1M山梨醇悬浮细胞 6 如上离心，用1 ml 预冷的1M山梨醇悬浮细胞，至终体积约1.5ml 注意：可冻存80ul 等量的电感受态细胞，但转化效率会降低很多 有谁能告诉我这步骤里面灭菌水，山梨醇处理细胞毕赤酵母细胞的原理是什么啊？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 | 基因克隆与表达 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 感受态细胞转化后的存放问题
已经有8人回复
- 制作的感受态细胞热击转化后在培养皿上成薄雾状？
已经有8人回复
- 毕赤酵母电转化问题求助
已经有26人回复
- 感受态细胞转化，50ul感受态细胞+50ulDNA，能成功吗？
已经有20人回复
- 感受态细胞转化
已经有17人回复
- 制作超级电转感受态注意事项
已经有8人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 由于中途有点事情，转化感受态细胞在哪一步可以停一停啊？
已经有7人回复
- 关于毕赤酵母电转化
已经有10人回复
- 电转化电击时间短，才2ms~什么原因？？？5555555555555
已经有11人回复
- 关于毕赤酵母gs115可否用转化化学转化
已经有6人回复
- 大肠杆菌电转感受态细胞的制备中遇到的问题
已经有8人回复
- 求助电转化相关问题
已经有11人回复
- 感受态细胞的浓度多大合适
已经有4人回复
- 求助毕赤酵母电转化问题
已经有6人回复
- 【专题】分子克隆实验专题--（五）感受态细胞的选择与使用
已经有15人回复
- 求助：毕氏酵母GS115感受态细胞的制备及转化方法
已经有5人回复
- 【求助/交流】求助：酵母感受态细胞的制备
已经有9人回复
- 浙江大学2006年分子生物学考博
已经有8人回复
- 电转化注意事项
已经有14人回复
- 毕赤酵母表达（总是整合不上）
已经有17人回复
★
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
 |
2楼2013-04-15 09:47:40
3楼2013-04-15 10:28:25
爱上文慧
银虫 (小有名气)
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 439.3
- 散金: 30
- 帖子: 56
- 在线: 36.8小时
- 虫号: 1916528
- 注册: 2012-07-30
- 性别: MM
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
4楼2013-04-15 11:27:53
liyuanming
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 109.9
- 帖子: 16
- 在线: 9.7小时
- 虫号: 2336084
- 注册: 2013-03-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫相关疾病其他科学问题
5楼2013-04-15 11:30:10
々暧-〃
版主 (文学泰斗)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 2.201
- 金币: 9937.5
- 散金: 34929
- 红花: 566
- 沙发: 5989
- 帖子: 56884
- 在线: 3002.1小时
- 虫号: 1477364
- 注册: 2011-11-05
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
- 管辖: 课件资源
6楼2013-04-15 12:28:28
★
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
|
|
7楼2013-04-15 18:26:20
★
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
cuicchao(金币+1): 谢谢参与
|
|
8楼2013-04-15 19:43:07
cuicchao
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1263.7
- 散金: 100
- 帖子: 359
- 在线: 490.2小时
- 虫号: 1572195
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
9楼2013-04-15 22:46:47
cuicchao
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1263.7
- 散金: 100
- 帖子: 359
- 在线: 490.2小时
- 虫号: 1572195
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
10楼2013-04-15 22:52:27
