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guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何得到CDNA全长

我用同源克隆的方法得到了一个基因的DNA全长序列,可不可以用扩DNA时的引物来扩增CDNA呢?
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lyl_622

新虫 (初入文坛)

在甜橙基因库中搜索了一个已知基因的完整序列,我要用椪柑的cDNA为模板来跑PCR,之后跑电泳,回收测得椪柑中这个基因的完整序列。这个基因3750bp,采用了首尾各取18bp来设计上下游引物,重复10次后都是二聚体,没有出现目的条带。请问如何设计引物来获得cDNA全长,谢谢各位了(新手请多包涵)。
9楼2014-03-21 16:55:06
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labixiaotao

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking: 金币+6, 鼓励新虫发帖交流,欢迎道生物医药区 2013-04-07 20:16:39
我克隆的是葡萄的基因,但是在ncbi和genoscope上公布的这个基因序列不一样,应该怎么办啊
2楼2013-04-07 16:40:15
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zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 21:19:35
请使用RACE法,可以克隆得到全长cDNA.
生而不息,奋斗不止!
3楼2013-04-07 17:12:49
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小小树虫

银虫 (小有名气)

使用扩DNA时的引物不行   一般做RACE
4楼2013-04-07 17:29:50
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