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崔永霞

铁虫 (小有名气)

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[求助] RACE技术 cDNA全长 DNA全长

我现在已经根据保守序列设计引物，扩增出核心片段，然后通过RACE技术获了cDNA全长，现在我如何根据cDNA序列才能得到DNA的全长呢？因为我想接下来做SNP。
求各位高手指点。

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每个人都有心底最柔软的地方，请不要触碰它，因为每个人都有自己的尊严！

1楼2013-01-12 11:01:08

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supersky3195

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+4, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-01-12 19:00:42

你根据核心片段设计RACE引物，退火温度要高些，60度以上，70的也可以。然后做3'和5’RACE，之后根据测序结果拼接你的全场。引物可以设计2对，2个上游引物为3’RACE引物，2个下游的为5'RACE引物。
我只是说一下简略的概述，具体你最好阅读TAKARA的试剂盒说明书，那些会告诉你更详细的内容。