24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 3276  |  回复: 8

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何得到CDNA全长

我用同源克隆的方法得到了一个基因的DNA全长序列,可不可以用扩DNA时的引物来扩增CDNA呢?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

labixiaotao

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking: 金币+6, 鼓励新虫发帖交流,欢迎道生物医药区 2013-04-07 20:16:39
我克隆的是葡萄的基因,但是在ncbi和genoscope上公布的这个基因序列不一样,应该怎么办啊
2楼2013-04-07 16:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangquan084

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 21:19:35
请使用RACE法,可以克隆得到全长cDNA.
生而不息,奋斗不止!
3楼2013-04-07 17:12:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小树虫

银虫 (小有名气)

使用扩DNA时的引物不行   一般做RACE
4楼2013-04-07 17:29:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小小树虫 at 2013-04-07 17:29:50
使用扩DNA时的引物不行   一般做RACE

为什么不行呢?我的DNA序列是全长也不行么
5楼2013-04-07 17:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

baby1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
guaiyaya: 金币+5, 有帮助 2013-04-08 10:44:16
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助! 2013-04-27 21:19:46
因为RACE的引物,有一个是通用引物,一个是基因特异性引物,首先你的保证GSP可以和试剂盒提供的通用引物配对才能扩增。DNA的引物可以拿来扩增cdna,但要看你的目的是什么了,如果是全长的话,一般是得不到的。
加油。
6楼2013-04-07 21:55:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thinkdoll

金虫 (小有名气)

能的,lz绝知此事要躬行啊!先干再说,也不麻烦。
记得回来向大家汇报心得啊!
7楼2013-04-08 15:50:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guaiyaya

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by thinkdoll at 2013-04-08 15:50:07
能的,lz绝知此事要躬行啊!先干再说,也不麻烦。
记得回来向大家汇报心得啊!

刚试着扩了一下,DNA长度为2300多bp,可是扩出来上游缺了不到100bp的片段,不知道是不是内含子,2000多的片段不可能就只有一个内含子吧?
8楼2013-04-08 16:44:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyl_622

新虫 (初入文坛)

在甜橙基因库中搜索了一个已知基因的完整序列,我要用椪柑的cDNA为模板来跑PCR,之后跑电泳,回收测得椪柑中这个基因的完整序列。这个基因3750bp,采用了首尾各取18bp来设计上下游引物,重复10次后都是二聚体,没有出现目的条带。请问如何设计引物来获得cDNA全长,谢谢各位了(新手请多包涵)。
9楼2014-03-21 16:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 guaiyaya 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 337求调剂 +5 《树》 2026-03-29 5/250 2026-03-30 07:38 by Iveryant
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +10 大馋小子 2026-03-28 10/500 2026-03-29 23:35 by 飞行日记西
[考研] 一志愿北京工业大学,324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 22408 359分调剂 +4 Qshers 2026-03-27 6/300 2026-03-29 14:16 by Qshers
[考研] 0856求调剂 +7 楒桉 2026-03-28 7/350 2026-03-29 08:28 by fmesaito
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +6 崔wj 2026-03-26 6/300 2026-03-29 01:11 by hanserlol
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 085405 考的11408求各位老师带走 +3 Qiu学ing 2026-03-28 3/150 2026-03-28 09:19 by 乐呵呵的追梦人
[考研] 材料求调剂一志愿哈工大324 +7 闫旭东 2026-03-28 9/450 2026-03-28 08:51 by Xu de nuo
[考研] 286求调剂 +4 丢掉懒惰 2026-03-27 7/350 2026-03-28 08:07 by baoball
[考研] 张芳铭-中国农业大学-环境工程专硕-298 +4 手机用户 2026-03-26 4/200 2026-03-28 07:17 by mmm just
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +10 材料学257求调剂 2026-03-23 11/550 2026-03-27 10:13 by YCIT- LHL
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见