| 查看: 463 | 回复: 1 | ||
[求助]
植物微量DNA提取
|
|
之前一直做毛状根DNA提取，提不出来，后来知道有微量DNA提取方法，现在想试着提一下~ 看很多文献的DNA提取缓冲液(100 mmol/L pH 8.0的Tris HCl，20 mmol/L pH 8.0的EDTA，500 mmol/L NaCl，10 ％SDS）都不同，这是我看文献上面说的，大家都用什么样的DNA提取缓冲液呢？ 实验步骤现在初步设计如下，请大家帮看下是不是可行呢？ 1. 取600 μl DNA提取液于1.5 ml EP管中，65 ℃预热25 min 2. 称取20 mg样品于液氮中研磨至灰白状粉末，放入装有DNA提取液的1.5 ml EP管，65℃恒温水浴15 min，其间摇匀2次 3. 加入等体积的Tris饱和酚：氯仿：异戊醇(25：24：1)，混匀约l0 s后， 60 ℃水浴10 min，12000 rpm离心10 min 4. 取上清液分装于新的EP管，每管装上清液约300 μl，加入300 μl异丙醇，混匀，见絮状物，-20 ℃沉淀15 min。 5. 取出EP管，12000 rpm离心10 min，弃上清液 6. 用75 ％乙醇洗涤DNA沉淀2次，每次静置5 min（除去乙醇），加50 μl水溶解沉淀，于-20 ℃贮存备用。 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有199人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DNA测纯度步骤是什么啊？
已经有15人回复
- 提取植物DNA，求助~~~
已经有21人回复
- 湿地植物根际土壤微生物总DNA提取
已经有6人回复
- 刚接触植物DNA的提取，大家帮我看看我提取的DNA跑的电泳图
已经有7人回复
- 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片
已经有7人回复
- 植物DNA提取
已经有15人回复
- 请问大家，提取DNA时液氮研磨组织或植物叶片的作用是什么？
已经有10人回复
- 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
已经有8人回复
- 动植物样品的采集及DNA样品的提取(ZT)
已经有10人回复
- 植物干样DNA提取试剂盒
已经有15人回复
- 如果想重复利用提取植物样品DNA的小塑料研磨棒，如何去除DNA？
已经有16人回复
- 在DNA提取过程中遇到了困惑，希望朋友们可以解答一下,提DNA 的高手请进！！！
已经有15人回复
- 超低温保存植物组织ＤＮＡ提取问题
已经有7人回复
- 用于提DNA植物根样本保存方法
已经有1人回复
- 【求助/交流】求动物组织DNA提取方法
已经有8人回复
- 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！
已经有14人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
2楼2013-03-28 16:19:23
