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AFLP这样的结果是怎么回事
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zhangyonghu
木虫
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[交流]
AFLP这样的结果是怎么回事
我的DNA是最右边的6个,中间是酶切连接,左边是欲扩,现在结果如图
这是怎么回事啊 ?
大神们给看看吧
未命名.jpg
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1楼
2013-03-25 08:27:26
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zhangyonghu
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6楼
:
Originally posted by
liulei198477
at 2013-03-25 23:05:49
预扩产物跑聚丙烯酰胺胶了吗?不知道你用什么酶组合?酶切和连接看着还可以。我觉得可能原因有这么几个:
1、继续稀释你的连接产物做预扩。
2、循环数有问题,做个循环梯度,在18-25之间。
3、Mg离子做个梯度。
...
欲扩没有跑聚丙烯酰胺胶,我的是PstI,MseI组合。
连接产物也需要稀释么?
我现在是30个循环
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7楼
2013-03-26 06:45:02
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liugs
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zhangyonghu(金币+1): 谢谢参与
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2楼
2013-03-25 09:54:58
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zhangyonghu
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2楼
:
Originally posted by
liugs
at 2013-03-25 09:54:58
感觉预扩增片段稍大!
电泳是采用什么染色方法?是电泳前加的染色,还是电泳之后染色?
是用的核算染料染的,溶胶的时候加的,
你觉得是什么原因导致的欲扩片段偏大呢,我的酶切连接的结果怎么样啊?
谢谢
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4楼
2013-03-25 19:44:44
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liulei198477
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★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2013-03-26 04:21:35
1949stone: 回帖置顶
2013-03-26 07:42:00
预扩产物跑聚丙烯酰胺胶了吗?不知道你用什么酶组合?酶切和连接看着还可以。我觉得可能原因有这么几个:
1、继续稀释你的连接产物做预扩。
2、循环数有问题,做个循环梯度,在18-25之间。
3、Mg离子做个梯度。
如果还不行,那只能从新做酶切和连接,连接很关键。
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6楼
2013-03-25 23:05:49
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