24小时热门版块排行榜    

查看: 4682  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

[交流] 色谱柱柱压异常高,尝试了多种办法,请教高人

柱子型号:Jupiter C4 reversed phase column (250 mm × 4.6 mm, 300 -sized pores, 5-μm sized particles)
进样:植物蛋白粗提液,过0.45膜
流动相:70%水30%乙腈,结束试验后用100%乙腈冲洗
问题:用了两三天后,柱压奇高,达到220左右,用100%乙腈冲洗,柱压正常,在45-48之间
采取措施:超声筛板,无用;反相冲洗,无用;低流速5%甲醇冲洗两天后,采用流动相仍在190左右
所以,在此请高人指点,如果操作,为什么100%乙腈冲洗时正常,柱子真得堵了吗?
附件是我在网上搜集的液相色谱柱的清洗与再生方法,感谢大家,在此分享[ Last edited by hsd3521 on 2013-3-26 at 07:53 ]
回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈:小木虫仅提供交流平台,不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : 高效液相色谱柱清洗与再生方法.pdf
  • 2013-03-26 07:53:31, 966.76 K

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by heyo_123 at 2013-03-24 10:55:46
让我猜一下,没测过蛋白,但可能是如下原因:
1.你所分析的蛋白,在乙腈中溶解性好,但在水中,可能会析出,在你现在的色谱条件下,使用时间长,肯定会堵柱。
建议接一个保护柱。
测试你的样品的溶解性,溶于水吗 ...

感谢您的回复,我是豆类蛋白粗提液,基本全是水溶体系
取下柱子,就没柱压了,最高在5左右
8楼2013-03-25 07:55:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

heyo_123

至尊木虫 (职业作家)



crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-03-24 14:53:08
让我猜一下,没测过蛋白,但可能是如下原因:
1.你所分析的蛋白,在乙腈中溶解性好,但在水中,可能会析出,在你现在的色谱条件下,使用时间长,肯定会堵柱。
建议接一个保护柱。
测试你的样品的溶解性,溶于水吗?
柱压高?真是柱的原因吗?取下柱子,看看柱压。
再说低流速的甲醇水,5% 也有点太低了吧?虽然你的柱可以用水冲,但还是有机相比例高些好点吧...
2楼2013-03-24 10:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huang19880

铜虫 (初入文坛)


可以一个个模块拆,排除看看是连上哪个模块压力大。如果柱温箱柱子前接口不连接,压力正常,连上柱子(柱后未连未连接检测器)压力就大了这样就是柱子问题了 。
4楼2013-03-24 11:13:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjzhang156

银虫 (著名写手)


乙腈压缩系数小,纯乙腈当然压力小了,你比前后的压力应该是一个流动相比列,100%水和100%乙腈差别当然大了
5楼2013-03-24 14:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +7 简单点0 2026-03-17 7/350 2026-03-21 08:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-17 8/400 2026-03-21 02:12 by JourneyLucky
[考研] 280求调剂 +7 咕噜晓晓 2026-03-18 8/400 2026-03-21 01:27 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 0856调剂,是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 0817调剂 +3 没有答案_ 2026-03-14 3/150 2026-03-19 09:51 by Xu de nuo
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
信息提示
请填处理意见