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402403660

银虫 (初入文坛)

[求助] 启动子克隆求助

克隆启动子,在启动子上设计了若干对引物,PCR检测呈阳性的有两对引物,分别为F1、R1和F2、R2,这两对引物从3‘到5’依次为F1,F2,R1,R2。我想问一下为什么我用F1和R2作为引物对的PCR结果是阴性?(F1至R2约2500bp,PCR程序为30个循环,每个循环中解链30″,延伸两分钟)
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
402403660: 金币+5, ★★★很有帮助, 3Q,我查了下 确实这样 2013-03-20 08:42:32
用taq酶P的吗?一般taq酶扩增2.5kb的片段最好用2.5分钟延伸(1kb/min)。
2楼2013-03-20 03:34:55
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