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402403660

银虫 (初入文坛)

[求助] 启动子克隆求助

克隆启动子，在启动子上设计了若干对引物，PCR检测呈阳性的有两对引物，分别为F1、R1和F2、R2，这两对引物从3‘到5’依次为F1，F2，R1，R2。我想问一下为什么我用F1和R2作为引物对的PCR结果是阴性？（F1至R2约2500bp，PCR程序为30个循环，每个循环中解链30″，延伸两分钟）
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勤奋工作 千秋万载 一统江湖
1楼 2013-03-19 23:53:47
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
402403660: 金币+5, ★★★很有帮助, 3Q，我查了下 确实这样 2013-03-20 08:42:32
用taq酶P的吗？一般taq酶扩增2.5kb的片段最好用2.5分钟延伸（1kb/min）。
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2楼2013-03-20 03:34:55
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