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linxi8579

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请问bluescript是哪种类型的载体已有7人参与

文献中提到pBluescript这个载体,正符合我的实验要求,但是不知道这是个什么类型的载体啊,是粘粒吗?我是要在真菌里连上基因自身的启动子表达的,不知道能不能用啊。
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-30 20:52:45
linxi8579(金币+1): 2010-06-01 10:44:33
貌似不行啊,主要不是穿梭质粒,没有真核复制起始位点不能在真菌里复制啊。。。
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
2楼2010-05-30 17:39:09
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)

pBluescript-SK是一般的克隆载体,和pUC19很类似

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-30 21:24:39
linxi8579(金币+2): 2010-06-01 10:45:07
pBluescript-SK是一般的克隆载体,和pUC19很类似。如果构建转化用载体的话只能用做中间载体。不过如果只是做瞬时表达的话应该不会有问题。

3楼2010-05-30 21:05:45
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ben1147

木虫 (正式写手)

linxi8579(金币+1): 2010-06-01 10:45:27
pBluescript是大肠杆菌宿主的克隆质粒,没有酵母的复制起点,在酵母里没法复制。
一般就是做克隆用,另外还可以和辅助噬菌体一起用于合成单链DNA
4楼2010-05-30 22:40:29
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-05-30 21:05:45:
pBluescript-SK是一般的克隆载体,和pUC19很类似。如果构建转化用载体的话只能用做中间载体。不过如果只是做瞬时表达的话应该不会有问题。


你说的中间载体是说转进宿主后同源替换吗,瞬时表达好像没听过啊?有可能吗?那能有多少产物啊?
5楼2010-06-01 10:47:58
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个是一般的公司克隆用的载体,~
6楼2010-06-01 11:13:05
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
linxi8579(金币+4): 2010-06-04 09:24:38
引用回帖:
Originally posted by linxi8579 at 2010-06-01 10:47:58:

你说的中间载体是说转进宿主后同源替换吗,瞬时表达好像没听过啊?有可能吗?那能有多少产物啊?

我说的中间载体是指在目的片段连接上去以后还不能满足应用的目的,而是利用上面的酶切位点再连接启动子、报告基因等元件组成一个完整的表达盒,最后整体再链接到Ti质粒载体上。瞬时表达因为不需要基因组DNA的插入,因此不需要具备Ti质粒的特征。所以就可以用了。
7楼2010-06-01 18:32:13
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dfl204 at 2010-06-01 18:32:13:


我说的中间载体是指在目的片段连接上去以后还不能满足应用的目的,而是利用上面的酶切位点再连接启动子、报告基因等元件组成一个完整的表达盒,最后整体再链接到Ti质粒载体上。瞬时表达因为不需要基因组DNA的 ...

非常感谢啦
8楼2010-06-04 09:27:01
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雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫


linxi8579(金币+1):谢谢参与
普通的克隆载体!
梦在路就在!
9楼2010-06-04 10:33:25
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ouyangxian

新虫 (小有名气)

请问pbluescript SK+ 是自杀载体吗


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
请问pbluescript SK+ 是自杀载体吗?它能在链球菌里复制吗?谢谢!
10楼2010-11-23 15:31:41
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