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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量PCR的rox问题
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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR的rox问题

我用的是takara的试剂盒，一起是ABI steponeplus，试剂盒说明要用ROXⅡ，然后加了之后跑荧光定量，最后出来的结果，rox校正的图是乱七八糟的，但是不校正的结果是正常的，用知道原因的虫子给解释啊
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1楼 2013-03-14 09:51:34
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phhcrab

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-14 17:26:01
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器，ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话，可以确认一下你的设置是否正确，再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光源，如果试剂里的ROX水平不高的话，是可能会导致ROX校正后曲线杂乱的。
如果没选ROX校正，曲线还可以并且重复性也不错的话，那就可以直接分析了。
你可以再咨询一下仪器和试剂的厂家。
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2楼2013-03-14 12:00:00
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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by phhcrab at 2013-03-14 12:00:00
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器，ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话，可以确认一下你的设置是否正确，再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光 ...

试剂盒里有SYBR  ROX 和ROXⅡ都是分开装的，我是按照试剂盒上的要求 在stepone plus仪器上用加ROX的，刚刚接触这方面，可能设置方面还有不懂的地方。
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3楼2013-03-14 13:58:48
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fenggeshj

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by phhcrab at 2013-03-14 12:00:00
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器，ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话，可以确认一下你的设置是否正确，再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光 ...

楼主有解决这个问题吗？我用的也是Step one，也出现了一样的情况，请问ROX水平不高是指浓度低的意思吗？我是不是需要增加ROX浓度？
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4楼2022-04-19 14:12:10
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