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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR的rox问题

我用的是takara的试剂盒,一起是ABI steponeplus,试剂盒说明要用ROXⅡ,然后加了之后跑荧光定量,最后出来的结果,rox校正的图是乱七八糟的,但是不校正的结果是正常的,用知道原因的虫子给解释啊
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phhcrab

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-14 17:26:01
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器,ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话,可以确认一下你的设置是否正确,再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光源,如果试剂里的ROX水平不高的话,是可能会导致ROX校正后曲线杂乱的。
如果没选ROX校正,曲线还可以并且重复性也不错的话,那就可以直接分析了。
你可以再咨询一下仪器和试剂的厂家。
2楼2013-03-14 12:00:00
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禁锢挽歌

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by phhcrab at 2013-03-14 12:00:00
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器,ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话,可以确认一下你的设置是否正确,再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光 ...

试剂盒里有SYBR  ROX 和ROXⅡ都是分开装的,我是按照试剂盒上的要求 在stepone plus仪器上用加ROX的,刚刚接触这方面,可能设置方面还有不懂的地方。
3楼2013-03-14 13:58:48
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fenggeshj

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by phhcrab at 2013-03-14 12:00:00
你先确定一下你买的试剂盒是不是确实含有ROX的。
stepone这个仪器,ROX校正不是必须要做的。如果你要做的话,可以确认一下你的设置是否正确,再确认一下你选择的试剂跟这个仪器是否匹配。因为这个仪器用的不是强光 ...

楼主有解决这个问题吗?我用的也是Step one,也出现了一样的情况,请问ROX水平不高是指浓度低的意思吗?我是不是需要增加ROX浓度?
4楼2022-04-19 14:12:10
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