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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看看提取的DNA怎么回事,接下来该怎么办

刚提的DNA,之前叶子有在-20°保存两天后转到-80度保存,提取时叶子有变黄似乎是褐变了,提取的DNA结果如图,帮忙看看什么原因啊!是降解了吗?之后要做多态性的,这能做吗?急,请教啊!

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haha
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
点样孔附近比较亮,蛋白没去干净,吸上清时可能吸得太多;白色拖带,溶解过程中可能没加RNA酶,没有除净RNA;DNA上样太多,浓度太大,条带呈月牙状;底部太亮,多糖或其它杂质含量也较高。DNA的纯度不是太好,可以纯化一下。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2013-03-12 19:42:59
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 熊大斌 at 2013-03-12 19:42:59
点样孔附近比较亮,蛋白没去干净,吸上清时可能吸得太多;白色拖带,溶解过程中可能没加RNA酶,没有除净RNA;DNA上样太多,浓度太大,条带呈月牙状;底部太亮,多糖或其它杂质含量也较高。DNA的纯度不是太好,可以纯 ...

的确,没有加RNA酶,上样浓度1400——2500,3ul没有稀释,那该如何纯化呢?
haha
3楼2013-03-12 19:50:40
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2013-03-12 19:50:40
的确,没有加RNA酶,上样浓度1400——2500,3ul没有稀释,那该如何纯化呢?...

就是用氯仿/异戊醇再重新抽提一次。不过你可以将目前溶解的样,加一点RNA酶,去除RNA;浓度太大,稀释后在用,你说你要做DNA的多态性分析,应该问题不大,可以试试。
4楼2013-03-12 20:12:44
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