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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 帮忙看看提取的DNA怎么回事，接下来该怎么办
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看看提取的DNA怎么回事，接下来该怎么办

刚提的DNA，之前叶子有在-20°保存两天后转到-80度保存，提取时叶子有变黄似乎是褐变了，提取的DNA结果如图，帮忙看看什么原因啊！是降解了吗？之后要做多态性的，这能做吗？急，请教啊！

IMG_20130312_175046.jpg
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haha
1楼 2013-03-12 19:14:03
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
点样孔附近比较亮，蛋白没去干净，吸上清时可能吸得太多；白色拖带，溶解过程中可能没加RNA酶，没有除净RNA；DNA上样太多，浓度太大，条带呈月牙状；底部太亮，多糖或其它杂质含量也较高。DNA的纯度不是太好，可以纯化一下。
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下雨的傍晚
2楼2013-03-12 19:42:59
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下雨的傍晚

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 熊大斌 at 2013-03-12 19:42:59
点样孔附近比较亮，蛋白没去干净，吸上清时可能吸得太多；白色拖带，溶解过程中可能没加RNA酶，没有除净RNA；DNA上样太多，浓度太大，条带呈月牙状；底部太亮，多糖或其它杂质含量也较高。DNA的纯度不是太好，可以纯 ...

的确，没有加RNA酶，上样浓度1400——2500，3ul没有稀释，那该如何纯化呢？
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haha
3楼2013-03-12 19:50:40
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熊大斌

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 下雨的傍晚 at 2013-03-12 19:50:40
的确，没有加RNA酶，上样浓度1400——2500，3ul没有稀释，那该如何纯化呢？...

就是用氯仿/异戊醇再重新抽提一次。不过你可以将目前溶解的样，加一点RNA酶，去除RNA；浓度太大，稀释后在用，你说你要做DNA的多态性分析，应该问题不大，可以试试。
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4楼2013-03-12 20:12:44
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