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cnb1987

银虫 (小有名气)

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专业: 动物遗传学

[求助] 做荧光定量时看家基因的CT值？

大家好，最近在做荧光定量，做了几次之后，发现看家基因的CT值都在30左右，是不是我的模版量加的太少还是cDNA有问题？，一般三个重复三个，有的品均值值还在33左右，大家能给我点意见么？

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【求助/交流】荧光定量PCR的结果（CT值）怎么分析？已经有14人回复

1楼 2013-03-08 11:12:10

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cnb1987

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

6楼: Originally posted by hy_sandra at 2013-03-08 15:22:40
加模版通常變動不大，因螢光R值是取10的對數?K對應至ct，所以就算增量2倍，螢光增加兩倍，也只會增加約0.3個ct。所以要看，你的看家基因產物大小，一般不要超過300bp為佳，再?硪茨阍O的programe, 也許要改一下比較 ...

好的！
我20ul 体系模版加0.8ul
Stage 1 95℃ 5min
Stage 2(Reps 40) 95℃ 15s, 58℃ 15s, 72℃ 30s
Stage3 95℃ 15s, 60℃ 30s, 95℃ 15s
产物都很小都是一百左右！