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a406123610

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助!怎样用试剂盒提取用大肠杆菌转化了的质粒DNA,100ul溶液中含30-50ug

求助!怎样用试剂盒提取用大肠杆菌转化了的质粒DNA,100ul溶液中含30-50ug,我提的只有100ul溶液中含2-3ug,请高手指教!灰常感谢!
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a406123610

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-01 21:07:59
你提的浓度是2 ug/100ul,也就是2000ng/100 ul,即20 ng/ul对吧?确实有点低,我提的都是100 ng/ul左右,但这取决于你用的什么试剂盒,还有你用的初始材料,菌液的体积?长得如何?我一般都是过夜摇的试管,取2ml提 ...

用的试剂盒是Plasmid Mini Kit I (100),D6943-C1,菌液5ml过夜摇12-15h,请问你用的是什么试剂盒,点多少大肠杆菌到装有培养液的试管中?我想要得到100ul溶液中含30-50ugDNA,除了试剂盒、菌液等原因,可以用其它方法浓缩吗?
3楼2013-03-01 21:36:00
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查看全部 8 个回答

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你提的浓度是2 ug/100ul,也就是2000ng/100 ul,即20 ng/ul对吧?确实有点低,我提的都是100 ng/ul左右,但这取决于你用的什么试剂盒,还有你用的初始材料,菌液的体积?长得如何?我一般都是过夜摇的试管,取2ml提。
2楼2013-03-01 21:07:59
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

你连载体的origin都没说,怎么知道到底能提多少
不同载体copy数差几十倍到上百倍
4楼2013-03-01 22:37:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有些质粒的拷贝数低,提出来的量自然少。一般多摇些菌。提完觉得太稀的话可以用乙醇沉淀浓缩。
5楼2013-03-02 04:47:22
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