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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问，切胶回收后电泳检测，条带特别模糊，几乎看不到，还能继续连接转化吗
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970402570

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问，切胶回收后电泳检测，条带特别模糊，几乎看不到，还能继续连接转化吗

切胶前，胶的条带还可以，请问，切胶回收后电泳检测，条带特别模糊，几乎看不到，还能继续连接转化吗，这与后边的挑菌落有影响吗
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1楼 2013-02-23 17:16:31
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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个人经验还是浓度高些再做转化。
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2楼2013-02-23 19:15:36
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yibt

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
把你切胶前的照片和回收的照片传上来看看。
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3楼2013-02-23 23:07:08
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
切胶回收的损失有些大是正常的。不知道你回收后电泳上了了多少。但连接转化所需要的DNA量很少，即使条带模糊也应该是够用的。接着往下做吧。
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4楼2013-02-24 03:07:25
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我切胶后从来没检测过，从来没出过问题。
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5楼2013-02-24 04:29:14
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匿名

用户注销 (正式写手)
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6楼2013-02-24 08:27:00
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tianchunying

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以试试的 一般转化用的浓度很低的 用不到那么高 不过你的好好研究下切胶那步到底出了什么问题  以后好纠正
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天行健，君子以自强不息；地势坤，君子以厚德载物。
7楼2013-02-25 08:24:08
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mangmanglulu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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建议用narodrop2000什么的检测一下浓度，浓度太低影响转化效果，转不进去片段，你后面的挑菌还有意义吗？
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8楼2013-02-25 14:41:05
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a909649

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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9楼2013-02-25 17:25:15
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暖暖暖

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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切胶前，条带弱浅，则胶回收后用少量的去离子水溶解，或者直接配连接体系做连接。理论上能看见条带做连接没有问题。
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Only the strong survive.
10楼2013-02-26 10:52:53
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