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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切后切胶回收
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fayzhao

金虫 (小有名气)

[求助] 双酶切后切胶回收

各位虫友好：
目前，我正在做质粒双酶切，体系40ul：
dd水                       补足40ul
10Xtango buffer     4ul
质粒                       2ug
kpnI                        2ul
bglII                        2ul
37℃反应5h,电泳检测图如下：

目的是为了回收目的条带（300多bp），切胶回收用了takara的和axygen的，都没有回收到，跑胶没有任何条带。接下来我要做的是将目的基因连接到表达载体中，回收不到怎么办哪？求帮助！！！

2013-1-20双酶切_副本.jpg
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1楼 2013-01-23 17:10:19
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raindick1231

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fayzhao: 金币+1 2013-01-23 19:12:04
其实一般看不见条带 我也会做链接反应的
建议加大酶切的质粒用量 算算嘛 将近300bp的载体上只有1／10是你的片段，切下来当然弱了
也可以多做几管 一起溶胶后，加到同一个柱子中
赞一下 回复此楼
5楼2013-01-23 19:11:01
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