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柳杉DNA提取
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虫友们好!初来咋到,还请多多关照。 我正用CTAB法提取柳杉的dna,但是最后用70%酒精洗涤俩次后仍然量很多,但是用去跑PCR时,没结果。 我的方法是:1,油液氮研磨成粉末,转到加油STE的离心管中,充分摇匀,离心10分钟,去上清留沉淀。加热好的CTAB水浴30分钟,中间摇匀5-8次 2.离心10min,汲取上清液,加等体积的氯仿异戊醇洗涤,(重复操作直至分层没有蛋白层) 3,2/3体积的冷异丙醇沉淀30min 4.70%抽提俩次 5.通风处催干 6.加30ul的TE溶解 在提取过程中,STE洗涤时糖分很多,不知道是不是糖分没去干净,还是怎么的,就是提不出来DNA,还请各位多多指教,万分感谢!谁有更好的方法,也可以共享一下,谢谢! |
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