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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] TEV蛋白酶酶切体系是什么样的?

TEV蛋白酶酶切体系是什么样的?
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dshlove at 2013-01-16 15:00:13
TEV蛋白酶对酶切的缓冲液,温度等条件要求相对宽松,一般我们使用就是 50mMTris7.5 ,500mM NaCl,5%Glycerol,4℃过夜。

请问,如果我做100微升的体系,里面最多加多少微升的蛋白
3楼2013-01-17 09:32:12
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiapingshk: 金币+10, 有帮助 2013-01-17 09:30:24
TEV蛋白酶对酶切的缓冲液,温度等条件要求相对宽松,一般我们使用就是 50mMTris7.5 ,500mM NaCl,5%Glycerol,4℃过夜。
2楼2013-01-16 15:00:13
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-01-17 09:32:12
请问,如果我做100微升的体系,里面最多加多少微升的蛋白...

这得看你的酶的活性了,我们一般是1mg的酶去切100mg的蛋白(可能量有点多,自己做的酶,活性可能差点,但是用的不心疼)。
仅供参考。
4楼2013-01-17 10:39:59
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dshlove at 2013-01-17 10:39:59
这得看你的酶的活性了,我们一般是1mg的酶去切100mg的蛋白(可能量有点多,自己做的酶,活性可能差点,但是用的不心疼)。
仅供参考。...

如果我的体系一共是100微升,但是往里面加蛋白超过了50微升,会有不良影响吗?谢谢
5楼2013-01-17 16:59:39
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