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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

[求助] 目的基因合成在大肠杆菌里能表达么?

目的基因合成在大肠杆菌里能表达么?我想问一下,P出来的目的基因和合成的目的基因转到大肠杆菌里,都能正常表达么?我担心合成的表达不了,还有,合成目的基因都需要设计什么么?例如酶切位点,阅读框之类的东西。在重新设计引物能把合成的目的基因在大肠杆菌里能P出来么?谢谢各位大侠了!
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
当目的基因由于密码子的偏好性问题,无法在大肠杆菌里表达或表达量很低时(比如很多真核基因),可以考虑合成基因,合成的时候,需要对基因的密码子按照大肠杆菌的密码子偏好性进行优化。至于酶切位点什么的可以先不用考虑,因为公司会将你要合成的基因连接在一个质粒上,你可以重新设计引物进行扩增,这时可以加上你需要的酶切位点。
Thank-you,so-blue.
2楼2012-12-26 16:41:31
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zishilanxuan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2012-12-26 16:41:31
当目的基因由于密码子的偏好性问题,无法在大肠杆菌里表达或表达量很低时(比如很多真核基因),可以考虑合成基因,合成的时候,需要对基因的密码子按照大肠杆菌的密码子偏好性进行优化。至于酶切位点什么的可以先不 ...

哦,谢谢啊,那偏好性怎么看啊,是合成公司找,还是需要自己看啊
3楼2012-12-26 19:12:35
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

内容已删除
Thank-you,so-blue.
4楼2012-12-27 09:02:26
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