24小时热门版块排行榜    

查看: 2459  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

chengx1121

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教下RT-PCR空白对照为啥总有反应峰?

最近补实验空白对照总有反应峰,CT值跟正常样本都差不多,25上下就起峰了
看了下溶解峰,漂亮的很,连引物二聚体的影子都没有
我这是什么情况啊,该咋解决啊?

顺便再问下,各位读取CT值的基线一般怎么选啊?是默认还是自己调整?

这是我最近做的空白

这是溶解曲线



[ Last edited by chengx1121 on 2012-12-17 at 17:53 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

孙启亮

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是跑的内参的溶解曲线?如果内参的话是正常的,若不是内参的,很可能是你的目的基因未扩增出来,你设计的引物是有问题的,很可能是跟你的反转录试剂如oligodT或者是其他东西反应了
9楼2012-12-20 11:30:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
熔解曲线温度在80度以下的一般是引物二聚体。正常的峰在85度上下。此外,你的熔解曲线很乱啊。
2楼2012-12-18 07:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stewart3261

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的扩增曲线有点晚!熔解曲线有些乱!你用的是什么扩增试剂盒,哪家公司的?我们以前也出现过这种情况,我们解决的办法是直接换掉关键的东西。后来试剂盒(扩增)也换了。结果就漂亮很多!
3楼2012-12-18 09:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengx1121

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-18 07:39:02
熔解曲线温度在80度以下的一般是引物二聚体。正常的峰在85度上下。此外,你的熔解曲线很乱啊。

问题是这个曲线是空白对照啊……昨天做了几个空白,扩增曲线和溶解曲线还有更漂亮的,我不好意思帖出来……
试剂换了一个遍,空白还是会出现反应
4楼2012-12-18 13:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +3 爱看书的可乐 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:41 by imusthave
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:22 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[找工作] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:07 by oEVWOejN9taj
[找工作] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:47 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息,有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
请填处理意见