应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请教下RT-PCR空白对照为啥总有反应峰？
51/1返回列表
查看: 2623  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

chengx1121

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教下RT-PCR空白对照为啥总有反应峰？

最近补实验空白对照总有反应峰，CT值跟正常样本都差不多，25上下就起峰了
看了下溶解峰，漂亮的很，连引物二聚体的影子都没有
我这是什么情况啊，该咋解决啊？

顺便再问下，各位读取CT值的基线一般怎么选啊？是默认还是自己调整？

这是我最近做的空白

这是溶解曲线



[ Last edited by chengx1121 on 2012-12-17 at 17:53 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-12-17 17:51:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stewart3261

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的扩增曲线有点晚！熔解曲线有些乱！你用的是什么扩增试剂盒，哪家公司的？我们以前也出现过这种情况，我们解决的办法是直接换掉关键的东西。后来试剂盒（扩增）也换了。结果就漂亮很多！
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-18 09:28:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
熔解曲线温度在80度以下的一般是引物二聚体。正常的峰在85度上下。此外，你的熔解曲线很乱啊。
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-18 07:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengx1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-12-18 07:39:02
熔解曲线温度在80度以下的一般是引物二聚体。正常的峰在85度上下。此外，你的熔解曲线很乱啊。

问题是这个曲线是空白对照啊……昨天做了几个空白，扩增曲线和溶解曲线还有更漂亮的，我不好意思帖出来……
试剂换了一个遍，空白还是会出现反应
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-18 13:02:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chengx1121

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stewart3261 at 2012-12-18 09:28:25
你的扩增曲线有点晚！熔解曲线有些乱！你用的是什么扩增试剂盒，哪家公司的？我们以前也出现过这种情况，我们解决的办法是直接换掉关键的东西。后来试剂盒（扩增）也换了。结果就漂亮很多！

图是空白对照，理论上应该更晚出现或者根本不出现，这峰太漂亮了，郁闷的难受啊！
赞一下 回复此楼
5楼2012-12-18 13:03:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭