应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 融合pcr最后一步
91/1返回列表
查看: 2002  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长

[求助] 融合pcr最后一步

最近做融合，最后一步加入首尾引物一直没p出来，设计了一对内引物也一样，求高人指点

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
1楼 2012-12-02 00:09:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oyjz12

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试验时注意引物的使用，防止交叉！
赞一下 回复此楼
2楼2012-12-02 00:23:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
作为模板的pcr产物衔接片段多长？模板浓度，退火温度注意一下。这些比较重要。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2012-12-02 08:10:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqi20092

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
退火温度很重要，最好把你的引物都发过来看看，还有你的PCR条件都发过来，这样才好分析。
赞一下 回复此楼
4楼2012-12-02 12:31:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaodahe at 2012-12-02 08:10:39
作为模板的pcr产物衔接片段多长？模板浓度，退火温度注意一下。这些比较重要。

中间产物有p出来，就是用中间产物为模板加首尾引物p不出来

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
5楼2012-12-02 23:57:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangqi20092 at 2012-12-02 12:31:46
退火温度很重要，最好把你的引物都发过来看看，还有你的PCR条件都发过来，这样才好分析。

我用降落p的，其实最后一步就是一个二次pcr,按理说没那么难啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
6楼2012-12-02 23:59:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by catmihzh at 2012-12-02 23:57:26
中间产物有p出来，就是用中间产物为模板加首尾引物p不出来
...

我们都不再扩增了，浓度不够可以加几个循环吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
7楼2012-12-03 18:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两条DNA链之间交叉的区域有多长？
赞一下 回复此楼
jiayoubashaonian
8楼2012-12-03 20:55:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

catmihzh

木虫 (小有名气)

虫虫特攻队队长
引用回帖:
8楼: Originally posted by blackrose8089 at 2012-12-03 20:55:16
两条DNA链之间交叉的区域有多长？

20bp，融合有成功啊，就是最后一步加首尾引物没p出来

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
[url=http://weibo.com/2152924384?s=6uyXnP][img]http://service.t.sina.com.cn/widget/qmd/2152924384/13d43368/7.png[/img][/url]
9楼2012-12-04 00:17:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 catmihzh 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +11 Isak0320 2026-10-12 15/750 2026-10-14 21:55 by 猫鱼不是鱼
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+5 David1982 2026-10-13 8/400 2026-10-14 21:38 by lhw_GPA4.0
[硕博家园] 中科院海洋所招收海洋材料相关领域博士研究生及研究助理 +3 sujiner 2026-10-08 4/200 2026-10-14 20:40 by qicaiyun
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +3 xqy2009 2026-10-13 3/150 2026-10-14 20:17 by 43358052
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +6 13108017953 2026-10-08 6/300 2026-10-12 20:07 by w3w3y3
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭