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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于定量PCR
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古屋子

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于定量PCR

在做定量PCR中，一个样本的几个重复（replicate）之间的CT值会相差多少？
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1楼 2012-11-27 15:03:16
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weigh1111

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不会差太多，一般1个CT以内吧~当然如果你操作不好或者引物不好就可能会糟糕点……
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2楼2012-11-27 15:50:51
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Rick001

铁杆木虫 (职业作家)

钓鱼岛环保首席秘书

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
做的好的话相差不大，我们相差1的就算大的了。跟你的模版浓度啥的有关

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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☆☆☆想开了，便能走出去☆☆☆
3楼2012-11-28 00:22:44
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
古屋子: 金币+1, ★有帮助 2012-11-28 09:03:36
每个样品做3个重复，重复之间的CT应该在1CT以下，好的时候可以在0.5CT。
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4楼2012-11-28 08:33:44
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古屋子

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-28 08:33:44
每个样品做3个重复，重复之间的CT应该在1CT以下，好的时候可以在0.5CT。

那是不是必须在0.5之内呢？超过0.5了数据还能用吗？
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5楼2012-11-28 09:05:16
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 古屋子 at 2012-11-28 09:05:16
那是不是必须在0.5之内呢？超过0.5了数据还能用吗？...

也不是说不可以用，如果比1CT大的话说明重复性差，数据可信度降低。
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6楼2012-11-29 07:19:27
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872940890

铁虫 (小有名气)
0.5最多是1以下  只要扩增效率在90%到110%  数据都可用
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我知道我得继续努力！加油！
7楼2013-01-17 16:30:51
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