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DNA含量多少才能在琼脂糖凝胶上显示出亮带
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想问下各位大虾,DNA要上多少量才能在琼脂糖上显示出亮带啊。看marker中最亮的750bp的dna50ng就很亮了,可是我的总dna用核酸测定仪测出来是110ng/ul,伤了5ul有550ng怎么跑电泳都没见到亮带呢,想问下有哪些因素会影响亮带的显现,另外做过的一般上了多少含量的dna呢,希望各位有经验的大虾指点啊,感激不尽 |
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5楼2012-11-27 15:21:42
czdaeq
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助 2012-11-27 16:45:54
scelab: 金币+6, xxjl 2012-11-29 14:03:23
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scelab: 金币+6, xxjl 2012-11-29 14:03:23
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1、核酸检测仪既可以检测DNA也可以检测RNA,不知道楼主的DNA有没有用RNA酶消化呐? 2、一般电泳时,还会加loading dye 并且用量比较随意(严格来看,似乎要求DNA 5 ul:1 ul loading dye),所以电泳跑胶只能大概估计浓度,不知道楼主有么有考虑这点? 3、我们这边用得3K的marker,1、3、5k为亮条带,貌似认为是10ng/ul的量(这个一时也记不太清),所以应该不用太高的浓度就可以看见的,楼主还是看看电泳以前的步骤有么有问题吧 |
2楼2012-11-26 20:49:59
cicelyzh
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3楼2012-11-27 07:23:41
4楼2012-11-27 15:19:44







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