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引物二聚体会不会影响目的基因的迁移?
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如题 简单点说：切胶的时候 会不会你切300bp的条带 实际上是350bp或250bp长？ 或者 小片段会夹杂在大片段里 你切的大片段里最终还是存在有部分小片段？ 两个疑问 大家畅所欲言吧 |
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yyk81
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
曾秀凤: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 我们也是EB后染的 所以应该片段选择比较精确 对吧 结果切胶回收后检测还是会发现目的片段里有小片段的存在 所以很困惑 2012-11-26 08:54:12
感谢参与，应助指数 +1
曾秀凤: 金币+30, ★★★★★最佳答案, 我们也是EB后染的 所以应该片段选择比较精确 对吧 结果切胶回收后检测还是会发现目的片段里有小片段的存在 所以很困惑 2012-11-26 08:54:12
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你的问题应该分3个层面回答。1，引物二聚体不影响目的产物的迁移。2，目的带的大小想精确反映在胶上，电泳时不能加核酸染料，跑完胶后在再染色，跑出来是多大就是多大，不失真，不会出现250bp看起来像300bp的情况。3，如果想分开大小很接近两条带，需要提高分辨率，提高胶浓度是个好办法。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
6楼2012-11-25 08:11:25
2楼2012-11-24 14:52:21
seanzhu1996
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3楼2012-11-24 15:12:44
fendouysys
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4楼2012-11-24 15:16:30
50