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引物二聚体会不会影响目的基因的迁移?
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曾秀凤
木虫
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]
引物二聚体会不会影响目的基因的迁移?
如题
简单点说:切胶的时候 会不会你切300bp的条带 实际上是350bp或250bp长?
或者 小片段会夹杂在大片段里 你切的大片段里最终还是存在有部分小片段?
两个疑问 大家畅所欲言吧
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2012-11-24 14:44:10
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fendouysys
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有帮助, 多谢回帖 多交流哟
2012-11-26 08:50:48
这个是个问题,原因不太知道,也碰见过!
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4楼
2012-11-24 15:16:30
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as023
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专业: 基因表达调控与表观遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
曾秀凤: 金币+10,
★
有帮助, 我们在讨论说 目的片段与引物二聚体可以分的很开的情况下 会不会有部分引物二聚体它缠在目的片段中间 不能通过切胶的方法去除引物二聚体的小片段? 您觉得有这种可能不
2012-11-26 08:50:00
会。如果maker不好的话,那个带的位置就不对了
引物二聚体在跑胶时一般会在最下面,片段不会太大,100bp左右,如果你的目的片段小的话则有可能混在一起,但是片段大的话引物二聚体不会影响到
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2楼
2012-11-24 14:52:21
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seanzhu1996
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【答案】应助回帖
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很有帮助, 谢谢回复
2012-11-26 08:50:28
引物一般比较小,就是几十bp左右,引物双聚体主要会影响PCR的效率和结果,像楼主担心的问题一般不会发生。除非片段非常小,但是那样都可以直接合成了,无需PCR。
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3楼
2012-11-24 15:12:44
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zhaodahe
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【答案】应助回帖
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很有帮助, 嗯 我们一般用2%的胶跑 大体能够分开的 关键是我切胶后跑2100芯片发现居然切胶后回收的片段里面发现有小片段没有出除干净
2012-11-26 08:52:09
如果要回收小片段,可以用浓一点儿的凝胶跑产物,会好一些。有的时候两个片段太近,确实很难分开。
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼
2012-11-24 18:47:59
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