24小时热门版块排行榜    

查看: 5474  |  回复: 4

shiliyusly

新虫 (小有名气)

[求助] QPCR空白对照问题

我原来是食品专业的,现在的研究生课题做杨梅花色苷基因表达丰度差异,我做的目的基因与看家基因ACT相对强度值很小,比其他人文献的小很多,不知道什么原因,所以ACT重做了次,并做了无模板的空白试验,发现空白组有扩增值,溶解曲线有两个小峰,不知道这是不是说明有污染?act1-act5是杨梅5个不同生长期。
麻烦高手指教,感激不尽那!

A2N9LK20J@AQJ8VQS$9%K{0.jpg



QV~`XH[AO6DDCBZ{K{GA3{1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
shiliyusly: 金币+5 2012-11-24 15:01:24
shiliyusly: 金币+12 2012-11-24 16:14:25
溶解首先你需要排除样品中是否有DNA的污染。从熔解曲线上看是应该形成了引物二聚体,所以读出的CT值比实际上可能偏小。引物是你自己设计的吗?最好重新设计一下引物。
2楼2012-11-24 02:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shiliyusly

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-11-24 02:38:04
溶解首先你需要排除样品中是否有DNA的污染。从熔解曲线上看是应该形成了引物二聚体,所以读出的CT值比实际上可能偏小。引物是你自己设计的吗?最好重新设计一下引物。

我的引物是借鉴别人文献原来设计好的,可能退火温度再摸索优化下吗?
3楼2012-11-24 15:01:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

应该是退火温度的问题
世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
4楼2012-11-24 16:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦幻心雨

银虫 (小有名气)

你好,我做的无模板阴性对照也有扩增曲线和溶解曲线,也有CT值,请问你的问题解决了吗?谢谢!
科研工作于我若即若离。。。
5楼2017-05-25 19:52:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 shiliyusly 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见