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ninglz

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC空白对照问题求助 已有9人参与

进行HPLC分析,做了一个样品,是用甲醇溶解的,为了确定哪个是溶剂峰,我又另外进了一针空白样品(就是纯甲醇),进样量和HPLC条件完全一样。
可是为何溶剂峰的高度和样品中溶剂峰的高度相差那么多呢?
难道是样品中也有物质和溶剂峰的出峰时间一致?
还是别的什么原因呢?请各位大侠帮忙解释一下~~~

空白的HPLC如下:

样品的HPLC如下:
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ninglz

木虫 (小有名气)

补充

由于图片纵坐标不清楚,重新发一次哈
空白对照的HPLC:

样品的HPLC图:
2楼2010-05-14 16:49:26
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)


waiy2001(金币+1):谢谢回答 2010-05-14 22:44:12
ninglz(金币+2): 2010-05-17 08:44:52
一般是这么回事,如果样品中有强极性的成分,也会像溶剂一样基本没有保留的,楼主可以选择用流动相溶解样品,然后打一针流动相空白就可以确定第一个峰是不是样品中的成分。还有,保证你的样品已经烘干
药物合成
3楼2010-05-14 16:59:07
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caoyexia

银虫 (小有名气)


waiy2001(金币+1):首先谢谢参与,他要问的应该是出峰的时间相差太大吧 2010-05-14 22:45:07
ninglz(金币+1): 2010-05-17 08:44:55
肯定是物质和溶剂峰的出峰时间一致,否则高度相差不会很大
4楼2010-05-14 17:18:28
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xkp123

木虫 (著名写手)

ninglz(金币+2): 2010-05-17 08:45:01
上面的方法是对的,还有就是你加标进去确认,看哪个峰高加大,说明就是你的目标组分。
5楼2010-05-14 22:15:41
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limiaomiao8260

金虫 (小有名气)


waiy2001(金币+1):谢谢你的补充,常来呀 2010-05-16 23:16:33
ninglz(金币+3): 2010-05-17 08:45:07
一般来说要先进空白,再进样品,以免后补空白会有样品的残留,空白尽量选择流动相溶解,这样会和样品谱图重合的比较好  进样量要进满环
6楼2010-05-16 22:27:15
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dashushu

金虫 (小有名气)

ninglz(金币+1): 2010-05-17 08:45:11
严重同意5楼童鞋的说法!
7楼2010-05-16 23:00:49
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ninglz

木虫 (小有名气)

请教

引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-05-14 16:59:07:
一般是这么回事,如果样品中有强极性的成分,也会像溶剂一样基本没有保留的,楼主可以选择用流动相溶解样品,然后打一针流动相空白就可以确定第一个峰是不是样品中的成分。还有,保证你的样品已经烘干

您好!我试过用流动相溶解样品,但是,流动相的吸收很大,所以才换成甲醇溶解样品的,结果,还是有上述的一点小问题,呵呵
8楼2010-05-17 08:49:34
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mengyugong

金虫 (小有名气)


ninglz(金币+2): 2010-05-18 09:15:34
铁甲骑兵(金币+1):很有参考价值的建议。 2010-05-20 22:47:59
你的流动相是什么?

个人感觉5.6min和7.2min都有样品洗脱下来,对策:
1)进标样确定下这两个峰是不是含有样品
2)如果没有标品建议将洗脱液强度调小
9楼2010-05-17 23:08:47
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ninglz

木虫 (小有名气)

请教

引用回帖:
Originally posted by mengyugong at 2010-05-17 23:08:47:
你的流动相是什么?

个人感觉5.6min和7.2min都有样品洗脱下来,对策:
1)进标样确定下这两个峰是不是含有样品
2)如果没有标品建议将洗脱液强度调小

我的流动相是乙腈和水(0.1%的三氟乙酸)
10楼2010-05-18 09:16:11
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