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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 测序结果峰全部重叠
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laolaohutu

银虫 (正式写手)

[交流] 测序结果峰全部重叠 已有7人参与

测序结果峰全部重叠               有可能是什么原因，同时拿去测的样品，另一个就很漂亮
未命名.jpg
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    • 2012-11-20 21:25:42, 270.87 K

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请享受无法回避的痛苦
1楼 2012-11-20 21:29:08
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polepolar

银虫 (初入文坛)
★
1949stone: 金币+1, maybe 2012-11-21 07:24:24
可能是双克隆
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北京普尔普乐生物技术有限公司(www.polepolar.com)
2楼2012-11-21 00:57:08
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1949stone: 金币+1, 同意 2012-11-21 07:24:12
如果你是PCR产物直接测序，说明你的产物不特异，如果是载体测序，说明你提供的测序样不是单克隆。
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3楼2012-11-21 01:22:09
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laolaohutu

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by stone2239 at 2012-11-21 01:22:09
如果你是PCR产物直接测序，说明你的产物不特异，如果是载体测序，说明你提供的测序样不是单克隆。

是PCR产物直接测序，跑电泳的时候条带是很亮的单条带  特异性应该没有问题？？   因为这方面我也刚接触不久   交流交流
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请享受无法回避的痛苦
4楼2012-11-21 12:47:30
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很有可能是没有测出来，你看到的都是杂峰，如果你拉高信号，就可能看到你这样的结果，而且很多都是同样的碱基连着的，测序不成功的可能性很大啊
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行至水穷处，坐看云起时
5楼2012-11-21 13:06:57
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
单条带只能说明你PCR产物大小一致，但并不能保证都是相同的序列。连T载体转化测序吧，也不是很麻烦。
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6楼2012-11-21 13:07:58
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
测序公司一般会要求你提供PCR产物是否纯化的信息，如果没有且胶回收纯化，测序公司一般会给你纯化，当然不是无常的
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7楼2012-11-21 14:34:59
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liuqiuning

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该是引物特异性不高，和片段有两个以上结合位点。
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8楼2012-11-21 16:30:29
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个情况挺奇怪的
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9楼2012-11-21 17:06:43
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DAISY-000

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
还没碰到过这种情况
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10楼2012-11-23 08:57:11
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