应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 包涵体溶解问题
51/1返回列表
查看: 1827  |  回复: 13
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

红虫梦

新虫 (初入文坛)

[求助] 包涵体溶解问题

各位：包涵体用8M urea溶解，溶解离心之后完全不能过0.45um的滤膜，所以我觉得大部分没有溶解，而是形成了很小的颗粒。不知道有什么方法能够提高其溶解度。谢谢各位的指教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
梦想
1楼2012-11-14 15:20:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红虫梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by qazwsxedc9328 at 2012-11-17 00:19:17
可以用盐酸胍和DTT，看看溶解的效果。

我也想这样，但是因为我后续要过阳离子交换柱，担心盐酸胍会影响上柱，所以就没有用
赞一下 回复此楼
梦想
8楼2012-11-17 08:58:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

lioboo

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-11-17 10:01:21
除尿素之外再加0.06m/l tris缓冲液，7.5mm/lEDTA和1mm/lDTT，混合溶液用强剪切搅拌头搅拌
赞一下(1人) 回复此楼
死生挈阔与子同悦，执子之手与子偕老
2楼2012-11-14 22:04:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红虫梦

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lioboo at 2012-11-14 22:04:33
除尿素之外再加0.06m/l tris缓冲液，7.5mm/lEDTA和1mm/lDTT，混合溶液用强剪切搅拌头搅拌

我在里面加了0.2M tris，还有5mM的巯基乙醇。我这边没有强剪切搅拌头。以前我用超声辅助溶解，但是看了很多文献从来就没有用超声的，所以就感觉是不是超声对蛋白有影响或者也不能溶解蛋白，只是形成了肉眼看不到的小颗粒？谢谢！
赞一下 回复此楼
梦想
3楼2012-11-15 10:32:26
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lioboo

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 红虫梦 at 2012-11-15 10:32:26
我在里面加了0.2M tris，还有5mM的巯基乙醇。我这边没有强剪切搅拌头。以前我用超声辅助溶解，但是看了很多文献从来就没有用超声的，所以就感觉是不是超声对蛋白有影响或者也不能溶解蛋白，只是形成了肉眼看不到的 ...

超声应该不行吧，应该用搅拌
赞一下(1人) 回复此楼
死生挈阔与子同悦，执子之手与子偕老
4楼2012-11-15 20:26:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭