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没有烟总有花新虫 (初入文坛)
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[求助]
包涵体洗涤纯化
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“包涵体的洗涤问题 通常的洗涤方法一般是洗不干净的，我以前是这么做的，先把包涵体用6M盐酸胍溶解充分，过滤除去未溶解的物质，注意留样跑电泳，然后用水稀释到4M,离心把沉淀和上清分别跑电泳，如此类推可以一直稀释到合适的浓度，你可以找到一个合适去除杂质的办法，其实这就是梯度沉淀的方法，我觉得比通常的直接洗脱效果好” 我用上述的方法 但是调到4M后12000RPM离心没有看到沉淀析出。主要是洗涤后杂带太多了想用上述方法试试去除杂带，我想知道还有没有其他i的方法在过NI柱前能尽可能多的去除杂蛋白，因为后期要做包涵体复性，所以想得到比较纯的蛋白。谢谢  |
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