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RT-PCR引物稀释问题,欢迎战友们进来指导!急盼中
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2011加油
银虫
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(幼儿园)
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[交流]
RT-PCR引物稀释问题,欢迎战友们进来指导!急盼中
大家好,我的引物是交给英骏公司合成,之前没进行过引物稀释,大家帮忙看看我将这样配制是否正确,我需要的引物终浓度为10umol/L。以其中一管引物为例:nmols per OD=4.4,每管为1OD,离心后,先加入10ul DEPC水稀释成100umol/L母液,混匀,再取出100ul母液加入900ulDEPC水,混匀,即得10umol/L溶液。
另外,稀释的溶液说法不一,有用灭菌后的超纯水、TE溶液、DEPC水,是不是进行RT-PCR实验,采用DEPC水更好一些??
最后,英骏公司的DNA合成说明书背面,我有一些看不明白,给出这个信息
Scale of Synthesis:100nmole想说明的是什么哦??
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2012-11-01 19:48:36
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flyde1234
木虫
(正式写手)
应助: 8
(幼儿园)
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帖子: 314
在线: 383.2小时
虫号: 950380
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流
2012-11-02 13:56:21
2011加油: 金币+2, 恩,好的,谢谢指导。祝实验顺利
2012-11-02 14:41:36
楼主,稀释用水用二级水灭菌就可以了,如果没有用纯净水灭菌也可以,我们实验室是做过实验的发现它们之间对实验结果没什么影响。稀释的话你直接稀释成10uM就可以了,不用那么麻烦。
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9楼
2012-11-02 10:48:13
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