24小时热门版块排行榜    

查看: 2366  |  回复: 3

yuliansheng

金虫 (小有名气)

[求助] 单酶切与去磷酸化

在限制性内切酶酶切时,单酶切后,如果不立即进行去磷酸化,而是进行酶失活后直接-20°C保存,第二天再去磷酸化,这样可以吗?还有,载体质粒单酶切后去磷酸化,目的DNA单酶切后也必须进行去磷酸化吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学习....
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个问题可以;第二个问题:不能再去磷酸化,因为都进行去磷酸化后就不能连接了。
2楼2012-10-11 20:06:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yuliansheng: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 回复的非常详细,谢谢。 2012-10-19 09:50:26
另外,单酶切,要注意确保酶切完全,否则克隆时会出现大量的背景克隆。确保酶切完全的一个简单方法是利用double digestion designer 计算酶切你的载体DNA所需要的精确酶量。小木虫网站上有推荐,你搜一搜,应该还能找到链接,你可以试试。祝好运。
3楼2012-10-11 20:09:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-10-11 20:09:56
另外,单酶切,要注意确保酶切完全,否则克隆时会出现大量的背景克隆。确保酶切完全的一个简单方法是利用double digestion designer 计算酶切你的载体DNA所需要的精确酶量。小木虫网站上有推荐,你搜一搜,应该还能 ...

你好,谢谢你的回复。你能帮我找一下那个连接吗?谢谢。
学习....
4楼2012-10-19 09:51:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuliansheng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
[考研] 0854控制工程 359求调剂 可跨专业 +3 626776879 2026-03-14 9/450 2026-03-16 17:42 by 626776879
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 考研材料与化工,求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +5 是Lupa啊 2026-03-11 5/250 2026-03-13 22:13 by JourneyLucky
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 304求调剂 +7 7712b 2026-03-13 7/350 2026-03-13 21:42 by peike
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
信息提示
请填处理意见