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lxyyzz木虫 (小有名气)
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富含脯氨酸的蛋白质为什么在进行SDS-PAGE的时候，分子量会比本来的分子量大很多？已有1人参与
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RT，求高人解释，SDS-PAGE不是本来剔除了电荷的影响么。 另外，到底什么样的算脯氨酸“富集”？ |
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lxyyzz
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关于你说的这种情况，我觉得可能有些道理，但是我还有些疑问： 1. 以前有跑过富含半胱氨酸的蛋白质，但是分子量没发现差得很多啊。 2. 关于loading的处理，我们是用DTT做还原剂然后100度煮10min后上样，另外loading里面本来就存在EDTA。没有再补加过。我们实验室一直是这样操作的。 3. 我以前做过一个截短型GST标签的蛋白，加上GST标签实际分子量只有35kDa，但是它脯氨酸含量有些高，80个氨基酸有15个脯氨酸，实际电泳的结果在45kDa，多出来10kDa。我查了下，这80个氨基酸中并没有半胱氨酸。 我仍然觉得确实是脯氨酸的问题，只是不太明白为什么。 欢迎讨论交流！ |
8楼2012-11-09 14:05:14
lxyyzz
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2楼2012-10-10 09:01:33
3楼2012-10-12 22:29:01
lxyyzz
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4楼2012-10-13 09:59:47