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古韵清音

银虫 (小有名气)

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[求助] 请帮忙看看我的肝脏基因组提取的问题

今天用肝癌和肺癌组织提取的基因组，左边四个条带很浅的是肺癌，右边两个很亮的是肺癌，上样量是5ul。
我的问题主要有两个：
1、用分光光度计检测浓度，第二个肝癌基因组的浓度是100多ug/ml，肺癌的浓度也是100多

这个是怎么一回事，我觉得肝癌的明显没有100多，而肺癌的则不止100多。因为我下一步处理对基因组的量是有要求的，所以现在我拿不准应该依靠哪一个数据。
2、用的是qiagen的基因组提取试剂盒，操作全都是平行的。如果说是肝脏标本的问题，之前用这个标本提过RNA都没有问题，肺癌的也是提过RNA的，虽然冻融过两次，我觉得基因组应该比RNA要稳定很多吧。
是否提取肝脏的DNA有什么需要特别注意的地方呢？我也试了加RNA酶，完全没有影响诶

2012-09-13 genome liver c liver n lung 002c lung 002n.jpg

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1楼 2012-09-13 19:00:53

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古韵清音

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引用回帖:

4楼: Originally posted by jl860822 at 2012-09-14 17:06:03
泳道里的样品感觉跑的不太好看，您试试重新跑一次，或者也有可能是您拍照的时候出了些状况，然后这个分光光度计的话，可能不太准，我觉得您应该相信胶上的吧，然后就是您的问题表述不太准确

好吧果然昨天脑子完全是晕菜的么。。。
现在主要问题就是，请问一下肝脏的DNA提取比起别的组织来有什么需要特别注意的么？我现在就是肝脏的DNA提出来质量不好，今天重新平行地提了四管，有两管质量还可以，但是另两管不行，所以现在提取肝脏DNA成了个运气问题。用的是qiagen的DNA提取试剂盒。我看有人说是肝脏RNA含量特别高所以对提取的DNA有影响，我对照着一管加了RNase一管没有加RNase，但是结果都是一样的，还是质量不好。
谢谢你啊