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琼脂糖跑胶求助
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mao19881205
金虫
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性别: GG
专业: 作物分子育种
[
求助
]
琼脂糖跑胶求助
我刚开始做琼脂糖电泳,出现了这个问题,请大家指教。图片是单个基因DAN的条带。前面都应该没有条带,是对照。最后三个应该有。但出现了拖尾现象,看不清楚了。不能判断对照有没有条带。请问这是什么原因导致的?
2012-9-10..GIF
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1楼
2012-09-11 19:32:45
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qiuqu_200212
至尊木虫
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无助又无奈
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专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
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胶做得不好,没有溶解均匀,未冷却就倒胶。造成人为的弥散形式。
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无奈又无助的天鹅,孤零零
6楼
2012-09-12 08:06:53
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hch123
金虫
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专业: 抗体工程学
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mao19881205: 金币+2,
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2012-09-12 08:02:11
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流
2012-09-12 16:07:48
个人觉得你的胶没做好,你看你的Maker都拖成那样!建议楼主重做下。
做的时候琼脂糖一定要完全溶解,在液体中看不到油状物,但注意别容得太久。还不行电泳液也换下,电压调低跑得时间长点。
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脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
2楼
2012-09-11 20:59:49
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水月寺学徒
金虫
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江湖浪子,行游诗人
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在线: 72小时
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注册: 2012-01-17
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学
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mao19881205: 金币+1,
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2012-09-12 08:02:29
配胶是不是用的水哦?要用1X的TAE
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活出生而为龙的狷狂
3楼
2012-09-11 21:44:34
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小小技术官
木虫
(正式写手)
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在线: 232.5小时
虫号: 1972611
注册: 2012-09-04
性别: GG
专业: 常微分方程与动力系统
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mao19881205: 金币+2,
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2012-09-12 08:03:19
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助
2012-09-12 16:07:59
1.maker没有跑好,原因如同楼上,制胶存在问题,0.5×TBE也可以。
2.建议刚开始上样孔不要太多,否则弥散后条带不清楚。
3.拖尾现象为非特异扩增,适当提高退火温度。
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生活是一面镜子,要笑着面对!
4楼
2012-09-12 00:17:47
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