应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物回收测序问题
61/1返回列表
查看: 2194  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fengyunqb

新虫 (小有名气)

[求助] PCR产物回收测序问题

我用简并引物扩增未知基因。设计了几对引物。都出现了目的条带。发现其中两对引物的产物长度比较长。因为我最终是要拿到这个未知基因的全长。我想选择最长的目的条带去测序。最后用RACE扩增全长的时候就能省点力气。这样对吗？还有，可不可以直接胶回收纯化送去测序？省掉TA克隆。我的目的片段长度1300BP.谢谢解惑。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-06 12:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-09 11:36:19
可以直接产物拿去测序！
赞一下 回复此楼
生物化学与分子生物学
2楼2012-09-06 14:22:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

apple712

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-09-07 13:48:22
fengyunqb: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2012-09-09 11:36:31
原则上胶回收的产物可以直接拿去测序，可是考虑到你这个是race的中间序列，你用的兼并引物直接测序可能不一定成功，还是连到t载体上比较靠谱。另外，建议把所得到的片段大小跟你预期产物长度差不多的都拿去测序，这样会比较省时间。
赞一下 回复此楼
3楼2012-09-06 15:36:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andyzhengwp

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-09-09 11:36:43
你应该那你的目的条带去测序，其他的是杂带不能用，有可能是其他基因的，正好符合你的引物
赞一下 回复此楼
每天坚持一点点，终会成功！相信自己
4楼2012-09-07 09:27:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangguoqing

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
fengyunqb: 金币+1, ★有帮助 2012-09-09 11:37:04
当然可以，不过要确定你的产物胶回收后浓度够。
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-07 10:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smoon0506

木虫 (正式写手)

大师

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-09-07 13:48:03
原则上胶回收的产物可以直接拿去测序，可是考虑到你这个是race的中间序列，你用的兼并引物直接测序可能不一定成功，还是连到t载体上比较靠谱。另外，建议把所得到的片段大小跟你预期产物长度差不多的都拿去测序，这样会比较省时间。
赞一下 回复此楼
每天都学习一点点，每天都进步一点点。
6楼2012-09-07 10:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fengyunqb 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:31 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭