| 查看: 2923 | 回复: 38 | |||
[交流]
提RNA提伤了
|
|||
|
提RNA都快成提RNA工人了，提的次数那是个多啊，可是都要提提伤了，为什么老降解，怎么提都降解，到底是怎么回事，如果说夏天是因为天气热，这个天气怎么也会降解，是个什么情况？我把洗涤RNA的乙醇第一次配成70%，第二次配成73%左右了，不知道脑子怎么了，可能是抽了，老是配错。不知道这些有没有影响。这是我这两天提的RNA图，请大家看看我能不能往下做RACE，我实在没办法了，不知道 到底是个什么原因。今天测了下第一次提的OD值，两个OD260/280和浓度分别是：1.99，785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我觉得值还是蛮好的。我检测RNA的时候上样量是2ul。用的是普通的检测DNA的器皿，不过新换的电泳缓冲液。  2012-9-5-4.jpg  2012-9-6-2.jpg [ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有98人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 细菌RNA提取
已经有14人回复
- 提取RNA与做RT-PCR的问题
已经有26人回复
- 提取RNA电泳上样量
已经有21人回复
- 俺提的RNA，大家帮忙瞅瞅吧，怎么回事泥
已经有11人回复
- 新手提RNA，请教几个问题
已经有8人回复
- Promega SV提RNA
已经有10人回复
- RNA提取
已经有5人回复
- 提RNA时样品取材的问题？
已经有4人回复
- 【求助/交流】RNA提取结果分析
已经有42人回复
- RNA提取
已经有31人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所博士后招聘
+1/285
-
祈福中标
+1/226
-
青岛农业大学海洋学院招调剂硕士研究生
+1/88
-
中山大学附属医院实验和生信科研助理招聘
+1/83
-
中山大学环境材料团队招聘
+1/81
-
北京-89175-事业单位-诚征女友
+1/67
-
沈阳农业大学生物与医药专硕招收调剂生！！！！！！！！！！
+1/39
-
【分享】招收08工学硕士（要求过国家线）
+1/37
-
中南大学喻桂朋教授团队新增2026年博士研究生
+1/12
-
【2026调剂】南方科技大学-深圳理工大学-中科院 联培086000免疫方向(26.9入学)
+1/12
-
南昌一本市政工程接受调剂
+1/11
-
欢迎调剂报考
+1/10
-
【2026调剂】南方科技大学-深圳理工大学-中科院 联培086000免疫方向(26.9入学)
+1/8
-
同济大学环境学院 肖倩特聘研究员课题组 招聘硕士/博士（长期有效）
+1/6
-
多伦多大学 & Synetic Labs 招博士后/研究员
+1/5
-
哈尔滨工业大学(深圳)国家级青年人才机械工程、热能与能源等专业26年入学博士招生
+1/5
-
上海师范大学有机化学专业研究生招生
+1/3
-
2026调剂硕士生招生—北京双一流学科高校环境科学与工程专业
+1/2
-
欧洲手性光谱方向ROA/CPL/Raman imaging招收博士研究生及联合培养生（布拉格）
+1/2
-
上海交通大学AIMS-Lab招收AI for Science【智能制造】方向2026级博士生
+1/1
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yananhl: 金币+1, 恩，好。可能导致这种现象的原因很多吧，就是不知道哪步的原因。 2012-09-06 09:57:33
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-06 13:55:59
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yananhl: 金币+1, 恩，好。可能导致这种现象的原因很多吧，就是不知道哪步的原因。 2012-09-06 09:57:33
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-06 13:55:59
| 研究生期间也提了几百个，但是是植物RNA。当时用的管以及枪头都是Axygen的RNase free产品，试剂为TaKaRa的RNAiso，其余仪器以及试剂都是自己处理的。提取这么多次，绝大部分质量不错（电泳结合分光光度计测定OD260/OD280），个人感觉环境和操作都很重要。提RNA最好有个独立的实验室，是在没条件，最好有块独立的RNA操作区；在操作上，操作者的手套口罩等以及实验每步都要考虑如何操作能降低降解的几率。 |
12楼2012-09-05 20:40:25
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yananhl: 金币+1, 谢谢 2012-09-06 09:56:31
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-06 13:56:14
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
yananhl: 金币+1, 谢谢 2012-09-06 09:56:31
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-06 13:56:14
|
之前提过好多次RNA 人的肝癌组织的，每次的质量都挺好的，说说我的方法，首先要确保所用的移液器和枪头是RNase-free的 最好买进口的，提组织的时候研磨用的研钵和研钵棒要用DEPC水浸泡24h然后高压灭菌，最后烘干，烘干的过程中要用锡箔纸包封好。在研磨前最好把研钵和钵棒放在冰箱中预冷。磨组织的时候要在冰上，并且研钵中要加入trizol和液氮，磨的时候要快。另外就是要戴好手套和口罩。还要注意不要让大家在你身边来回走动，在实验过程中尽量不要对着试验台说话，提RNA的试验台要远离提质粒的试验台。我觉得这些都注意了应该就不会有什么问题了，希望对LZ会有帮助。 [ Last edited by angel_yy on 2012-9-5 at 20:56 ] |
13楼2012-09-05 20:54:46
18楼2012-09-06 13:42:57
2楼2012-09-05 16:51:19
3楼2012-09-05 16:53:43
4楼2012-09-05 17:06:35
5楼2012-09-05 17:52:44
6楼2012-09-05 17:59:49
7楼2012-09-05 19:07:49
8楼2012-09-05 19:44:39
9楼2012-09-05 19:52:27
10楼2012-09-05 19:52:55
11楼2012-09-05 20:21:36
14楼2012-09-05 21:15:32
15楼2012-09-05 22:01:13
16楼2012-09-06 00:29:23
17楼2012-09-06 09:10:56
19楼2012-09-06 16:17:42
20楼2012-09-06 19:15:41
21楼2012-09-06 19:51:59
22楼2012-09-06 20:02:22
23楼2012-09-06 20:48:41
24楼2012-09-06 20:59:05
25楼2012-09-07 09:43:09
26楼2012-09-07 09:47:45
27楼2012-09-07 10:05:52
28楼2012-09-07 10:14:42
29楼2012-09-07 11:05:50
30楼2012-09-07 12:00:32
31楼2012-09-07 12:19:53
32楼2012-09-07 12:37:47
33楼2012-09-07 12:43:44
34楼2012-09-07 16:52:42
35楼2012-09-09 20:46:40
36楼2012-09-10 10:44:25
37楼2012-09-10 17:57:44
38楼2012-09-10 19:09:03
39楼2012-09-11 19:48:14
