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yananhl

银虫 (小有名气)


[交流] 提RNA提伤了

提RNA都快成提RNA工人了,提的次数那是个多啊,可是都要提提伤了,为什么老降解,怎么提都降解,到底是怎么回事,如果说夏天是因为天气热,这个天气怎么也会降解,是个什么情况?我把洗涤RNA的乙醇第一次配成70%,第二次配成73%左右了,不知道脑子怎么了,可能是抽了,老是配错。不知道这些有没有影响。这是我这两天提的RNA图,请大家看看我能不能往下做RACE,我实在没办法了,不知道
到底是个什么原因。今天测了下第一次提的OD值,两个OD260/280和浓度分别是:1.99,785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我觉得值还是蛮好的。我检测RNA的时候上样量是2ul。用的是普通的检测DNA的器皿,不过新换的电泳缓冲液。

2012-9-5-4.jpg



2012-9-6-2.jpg

[ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ]
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angel_yy

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
15楼: Originally posted by yananhl at 2012-09-05 22:01:13
研磨的时候我们是用液氮直接预冷的,还有DEPC水我处理12小时就。...

我都是用负80的冰箱预冷的,应该差不多。我觉得提取RNA 细节很重要,开始的时候我提取的样品也会有降解的现象,找了好多次原因 总是找不到,后来莫名其妙的就不降解了 所以建议楼主每次都把细节问题处理好 就没问题了
25楼2012-09-07 09:43:09
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liuguilin

禁言 (文学泰斗)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以前读书时,有人专门晚上实验室人少时,提rna
2楼2012-09-05 16:51:19
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xfliu

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我要提500多个呢,现在提了100多个,质量还行
3楼2012-09-05 16:53:43
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asdkingstar

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
呵呵,同是天涯“沦落”人。深刻体会楼主此时的心情。
4楼2012-09-05 17:06:35
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