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yananhl

银虫 (小有名气)


[交流] 提RNA提伤了

提RNA都快成提RNA工人了,提的次数那是个多啊,可是都要提提伤了,为什么老降解,怎么提都降解,到底是怎么回事,如果说夏天是因为天气热,这个天气怎么也会降解,是个什么情况?我把洗涤RNA的乙醇第一次配成70%,第二次配成73%左右了,不知道脑子怎么了,可能是抽了,老是配错。不知道这些有没有影响。这是我这两天提的RNA图,请大家看看我能不能往下做RACE,我实在没办法了,不知道
到底是个什么原因。今天测了下第一次提的OD值,两个OD260/280和浓度分别是:1.99,785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我觉得值还是蛮好的。我检测RNA的时候上样量是2ul。用的是普通的检测DNA的器皿,不过新换的电泳缓冲液。

2012-9-5-4.jpg



2012-9-6-2.jpg

[ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ]
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angel_yy

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
yananhl: 金币+1, 谢谢 2012-09-06 09:56:31
小丹木木: 金币+3, 鼓励交流经验 2012-09-06 13:56:14
之前提过好多次RNA  人的肝癌组织的,每次的质量都挺好的,说说我的方法,首先要确保所用的移液器和枪头是RNase-free的  最好买进口的,提组织的时候研磨用的研钵和研钵棒要用DEPC水浸泡24h然后高压灭菌,最后烘干,烘干的过程中要用锡箔纸包封好。在研磨前最好把研钵和钵棒放在冰箱中预冷。磨组织的时候要在冰上,并且研钵中要加入trizol和液氮,磨的时候要快。另外就是要戴好手套和口罩。还要注意不要让大家在你身边来回走动,在实验过程中尽量不要对着试验台说话,提RNA的试验台要远离提质粒的试验台。我觉得这些都注意了应该就不会有什么问题了,希望对LZ会有帮助。

[ Last edited by angel_yy on 2012-9-5 at 20:56 ]
13楼2012-09-05 20:54:46
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liuguilin

禁言 (文学泰斗)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以前读书时,有人专门晚上实验室人少时,提rna
2楼2012-09-05 16:51:19
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xfliu

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我要提500多个呢,现在提了100多个,质量还行
3楼2012-09-05 16:53:43
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asdkingstar

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
呵呵,同是天涯“沦落”人。深刻体会楼主此时的心情。
4楼2012-09-05 17:06:35
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