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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提RNA提伤了
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yananhl

银虫 (小有名气)

[交流] 提RNA提伤了

提RNA都快成提RNA工人了，提的次数那是个多啊，可是都要提提伤了，为什么老降解，怎么提都降解，到底是怎么回事，如果说夏天是因为天气热，这个天气怎么也会降解，是个什么情况？我把洗涤RNA的乙醇第一次配成70%，第二次配成73%左右了，不知道脑子怎么了，可能是抽了，老是配错。不知道这些有没有影响。这是我这两天提的RNA图，请大家看看我能不能往下做RACE，我实在没办法了，不知道
到底是个什么原因。今天测了下第一次提的OD值，两个OD260/280和浓度分别是：1.99，785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我觉得值还是蛮好的。我检测RNA的时候上样量是2ul。用的是普通的检测DNA的器皿，不过新换的电泳缓冲液。

2012-9-5-4.jpg



2012-9-6-2.jpg

[ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ]
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1楼 2012-09-05 16:37:03
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yananhl

银虫 (小有名气)
引用回帖:
30楼: Originally posted by lmcyjxs at 2012-09-07 12:00:32
你好！我也还在提RNA，提的效果也不好啊~也纠结呢，
但看你的图，条带清晰，还有3条，我觉得你的提的量应该很多啊！就是降解了吧，因为你的5S带很亮，说明25S和18S降解成5S了吧，所以前两条带比较模糊。
我觉得 ...

我也是怀疑降解了，不过我氯仿去除是两次去除的。材料都是在液氮保存的。电泳槽之类的都是都是冲洗过的用电泳液。我跑的是用190V跑了五分钟也没什么问题。我测的OD值也蛮好，不知道是不是测OD值的机子不准。郁闷中！
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31楼2012-09-07 12:19:53
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liuguilin

禁言 (文学泰斗)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
以前读书时，有人专门晚上实验室人少时，提rna
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2楼2012-09-05 16:51:19
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xfliu

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我要提500多个呢，现在提了100多个，质量还行
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3楼2012-09-05 16:53:43
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asdkingstar

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
呵呵，同是天涯“沦落”人。深刻体会楼主此时的心情。
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4楼2012-09-05 17:06:35
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