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yananhl

银虫 (小有名气)


[交流] 提RNA提伤了

提RNA都快成提RNA工人了,提的次数那是个多啊,可是都要提提伤了,为什么老降解,怎么提都降解,到底是怎么回事,如果说夏天是因为天气热,这个天气怎么也会降解,是个什么情况?我把洗涤RNA的乙醇第一次配成70%,第二次配成73%左右了,不知道脑子怎么了,可能是抽了,老是配错。不知道这些有没有影响。这是我这两天提的RNA图,请大家看看我能不能往下做RACE,我实在没办法了,不知道
到底是个什么原因。今天测了下第一次提的OD值,两个OD260/280和浓度分别是:1.99,785.7ng/ul;2.02,1314ng/ul.我觉得值还是蛮好的。我检测RNA的时候上样量是2ul。用的是普通的检测DNA的器皿,不过新换的电泳缓冲液。

2012-9-5-4.jpg



2012-9-6-2.jpg

[ Last edited by yananhl on 2012-9-7 at 10:44 ]
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yananhl

银虫 (小有名气)


引用回帖:
30楼: Originally posted by lmcyjxs at 2012-09-07 12:00:32
你好!我也还在提RNA,提的效果也不好啊~也纠结呢,
但看你的图,条带清晰,还有3条,我觉得你的提的量应该很多啊!就是降解了吧,因为你的5S带很亮,说明25S和18S降解成5S了吧,所以前两条带比较模糊。
我觉得 ...

我也是怀疑降解了,不过我氯仿去除是两次去除的。材料都是在液氮保存的。电泳槽之类的都是都是冲洗过的用电泳液。我跑的是用190V跑了五分钟也没什么问题。我测的OD值也蛮好,不知道是不是测OD值的机子不准。郁闷中!
31楼2012-09-07 12:19:53
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liuguilin

禁言 (文学泰斗)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以前读书时,有人专门晚上实验室人少时,提rna
2楼2012-09-05 16:51:19
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xfliu

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我要提500多个呢,现在提了100多个,质量还行
3楼2012-09-05 16:53:43
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asdkingstar

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
呵呵,同是天涯“沦落”人。深刻体会楼主此时的心情。
4楼2012-09-05 17:06:35
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