24小时热门版块排行榜    

查看: 2062  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ying877211

银虫 (小有名气)

[求助] sds-page跑胶问题

向大家请教一个问题,我用TCA沉淀法提取的蛋白质,跑胶时候用水溶解,不容的时候加入NaoH调节至没有沉淀,pH大概在9左右,刚开始的时候都可以跑出条带,后来就一直没有跑出过条带来。后来在网上找到一个方法说用0.1M NaoH溶解即可,使用这个方法还是没有跑出条带来。请大家帮忙分析一下原因。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学生物的不容易啊!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhFGF21

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不建议用NaOH,直接用PBS重悬沉淀,在沸水浴中煮10分钟,高温变性溶解。。。
9楼2013-07-06 10:59:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

foxcl

铁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢交流,不过不是应助 2012-09-06 05:57:13
我这边是100%TCA沉淀,再用丙酮洗一次,37度烘干后,直接加50ul的5x loading buffer  95度煮5min。  然后直接10ul上样电泳

第一次做,结果明天才能出来。欢迎交流。
2楼2012-09-05 22:54:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

今天结果已经出来了,相比于直接上清电泳,分辨率确实有很大的提高。
3楼2012-09-06 09:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

m606

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你跑不出来应该先确定你的蛋白在哪里,若没在胶上,看看是不是在你上样前加loadingbuffer煮沸时的沉淀里,确定哪步出了问题,再解决
4楼2012-09-06 09:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见