24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1886  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ying877211

银虫 (小有名气)

[求助] sds-page跑胶问题

向大家请教一个问题,我用TCA沉淀法提取的蛋白质,跑胶时候用水溶解,不容的时候加入NaoH调节至没有沉淀,pH大概在9左右,刚开始的时候都可以跑出条带,后来就一直没有跑出过条带来。后来在网上找到一个方法说用0.1M NaoH溶解即可,使用这个方法还是没有跑出条带来。请大家帮忙分析一下原因。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学生物的不容易啊!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

m606

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你跑不出来应该先确定你的蛋白在哪里,若没在胶上,看看是不是在你上样前加loadingbuffer煮沸时的沉淀里,确定哪步出了问题,再解决
4楼2012-09-06 09:05:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

foxcl

铁虫 (正式写手)

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 应助指数-1, 谢谢交流,不过不是应助 2012-09-06 05:57:13
我这边是100%TCA沉淀,再用丙酮洗一次,37度烘干后,直接加50ul的5x loading buffer  95度煮5min。  然后直接10ul上样电泳

第一次做,结果明天才能出来。欢迎交流。
2楼2012-09-05 22:54:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)

今天结果已经出来了,相比于直接上清电泳,分辨率确实有很大的提高。
3楼2012-09-06 09:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ying877211

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by m606 at 2012-09-06 09:05:19
你跑不出来应该先确定你的蛋白在哪里,若没在胶上,看看是不是在你上样前加loadingbuffer煮沸时的沉淀里,确定哪步出了问题,再解决

我提的是菌的分泌总蛋白,就是要有很多条带才对。蛋白我测过OD值,也不少,就是跑胶一条带都没有。
学生物的不容易啊!
5楼2012-09-06 09:42:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂288 +6 ioodiiij 2026-04-10 8/400 2026-04-10 21:07 by zhouxiaoyu
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 一志愿京区985,085401,与本科专业一致,电子信息工程, +4 阳光开朗的男孩 2026-04-10 4/200 2026-04-10 18:27 by shenrf
[考研] 本9 一志愿西工大085601 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-10 16:57 by luoyongfeng
[考研] 08工学 309分求调剂 +6 Yin DY 2026-04-08 6/300 2026-04-10 09:18 by Delta2012
[考研] 266求调剂,一志愿哈工程电子信息,本科获多项国奖和省奖 +4 lumine1 2026-04-06 4/200 2026-04-09 17:38 by vgtyfty
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 二次调剂求老师收留 +3 笑笑袁 2026-04-08 3/150 2026-04-08 23:50 by 醉在风里
[考研] 327求调剂 +12 Xxjc1107. 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:46 by luoyongfeng
[考研] 071000生物学,一志愿深圳大学296分,求调剂 +12 TIckLw 2026-04-06 13/650 2026-04-07 20:34 by lijunpoly
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 一志愿北京化工085600 310分求调剂 +20 0856材料与化工3 2026-04-04 22/1100 2026-04-07 15:14 by 上岸快快
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 09:25 by 小黑不怕难
[考研] 材料工程310专硕调剂 +14 捞捞我…. 2026-04-04 15/750 2026-04-06 14:18 by lqwchd
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 22408 总分320,一篇论文二作,两个国三,求调剂 +3 Leomulufu 2026-04-04 5/250 2026-04-05 19:04 by chongya
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
信息提示
请填处理意见