24小时热门版块排行榜    

查看: 930  |  回复: 4

0008meng

至尊木虫 (正式写手)

[求助] 如何PCR出链霉菌的一个7KB的片段

各位大虾,小弟最近准备把链霉菌的一个7Kb大的片段给P出来。但听说链霉菌比较难做,心里怕第一步就失败。所以请问大家在链霉菌这方面有什么经验啊?有没有人曾经这样做成功过啊?求交流~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
0008meng: 金币+1 2012-08-31 10:11:54
0008meng: 金币+1 2012-08-31 10:15:50
哥用kod+dmso成功p出5kb,长点应该也可以,先试试呗,实在不行就在中间找个单酶切位点分开p,搬到质粒上拼

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
阳光总在风雨后
2楼2012-08-31 00:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufuliang

新虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
0008meng: 金币+2 2012-08-31 10:16:04
宝生物公司takara有一种专门扩增长片段dna的酶,10kb都没问题。但是很贵。10年轻就是1000多块10ul。
慢慢来!
3楼2012-08-31 00:23:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sadc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
0008meng: 金币+1 2012-08-31 10:19:18
用Takara的LATaq,没有问题的,10kb都没有问题。
提基因组的时候枪头最好剪平一点,不要过度剪切DNA。
另外提的各环节,要除去上清的时候,注意去除干净,保证尽可能少的蛋白污染。
4楼2012-08-31 07:05:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

andreai

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
0008meng: 金币+1 2012-08-31 10:19:23
我不知道步移法可不可以,不过要设计3个或3个以上引物吧
5楼2012-08-31 07:46:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 0008meng 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 3/150 2026-08-29 03:23 by gy1nBQXYQJqL
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +8 苏东坡二世 2026-08-23 8/400 2026-08-28 14:41 by lkforward
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
信息提示
请填处理意见