| 查看: 1104 | 回复: 3 | |||
[求助]
链霉菌转化后 提质粒验证 出现质粒上片段丢失的情况
|
|
我构建了一个 链霉菌的基因敲除载体，是双交换的。载体上位点处依次连接有左臂L、抗性标记K、右臂R 将载体转入链霉菌之后，对初步得到的转化子重新提质粒，进行验证。 PCR发现，构建到载体上的筛选标记K丢失了，就是对这个片段 做PCR 没有条带。（载体上的抗性标记A 依旧还有）。我不明白是什么原因。请各位大侠指教。 还有就是，这个片段，我用的是XbaI 酶切位点，依据我的片段测序结果，应该没有甲基化情况的发生。 请各位高人指点。谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考
已经有5人回复
-
279求调剂
已经有4人回复
-
284求调剂
已经有8人回复
-
材料复试调剂
已经有4人回复
-
本子写完了，给DS兄弟看了，得了92分
已经有7人回复
-
求调剂
已经有6人回复
-
材料学硕318求调剂
已经有13人回复
-
一志愿郑大材料学硕298分，求调剂
已经有5人回复
-
材料化工调剂
已经有13人回复
-
材料学硕318求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 质粒转化完后怎么做
已经有6人回复
- 质粒转化完 传代后发现变小 再传一代质粒直接消失了
已经有14人回复
- 做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why???
已经有24人回复
- 质粒转化到大肠杆菌野生菌中验证遇到的非常非常怪的问题
已经有3人回复
- 构建好的质粒如何防止丢失
已经有12人回复
- 求助：关于重组质粒目的条带丢失
已经有9人回复
- 质粒片段丢失问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】表达载体转化后,提取的质粒和原来不一样了啊
已经有5人回复
- 【求助/交流】提取链霉菌质粒
已经有8人回复
- 【求助/交流】质粒片段丢失问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】检测都目的片段，但提不出质粒！
已经有5人回复
2楼2012-10-25 11:06:03
xzx018
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 24 (小学生)
- 金币: 15649.7
- 散金: 746
- 红花: 2
- 帖子: 1835
- 在线: 783.5小时
- 虫号: 1058108
- 注册: 2010-07-15
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2012-10-29 08:53:20
4楼2013-01-07 10:40:14
10