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zhougama

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zhougama

禁虫 (正式写手)

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3楼2012-08-22 19:50:46
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zk0604

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-08-22 18:06:45
zhougama: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-08-26 19:45:06
这个要看你的蛋白结构,有几个亚基,亚基间的构象。二硫键在哪个位置也比较重要,如果靠得比较近的话,在氧化性的环境中还是比较容易形成二硫键的。
2楼2012-08-22 17:38:40
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mitocam

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 鼓励积极热心应助 2012-08-23 15:43:24
zhougama: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-08-26 19:45:21
很多办法。

如果你的运气好,将你的蛋白质在有还原剂(TCEP比DTT好)和无还原剂的条件下,跑非还原性的SDSPAGE,有时形成双流间的蛋白质迁移率有显著改变,你可以检测出来。

形成二硫键的的cys不会被化学修饰,在非还原状态下能被修饰的,加入修饰剂如NEM,中和了自由的cys,然后你加入大基团或荧光标记的cys修饰剂,能被修饰的就是形成二硫间的cys。大基团能够引起蛋白质在SDSPAGE的迁移改变,能够被检测出来。
4楼2012-08-22 21:08:43
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zhougama

禁虫 (正式写手)

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5楼2012-08-22 21:51:49
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