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飘零的叶子

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[交流] SDS-PAGE中上样缓冲液中加入DTT是什么作用

如题，哪位大侠能给解释下上样缓冲液中DTT的作用啊，加与不加DTT在SDS-PAGE中有什么区别？！

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1楼 2012-08-13 17:03:28

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lou87

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小丹木木: 金币+3, 鼓励交流 2012-08-14 13:41:47

是一种强还原剂，能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，而sds可以破坏蛋白质的二三级结构，二者使蛋白质呈线性，忽略电荷因素，其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT，则蛋白质的线性多肽链未完全打开，其分子空间结构也会影响迁移率。

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3楼2012-08-13 17:52:47

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lou87

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4楼: Originally posted by 飘零的叶子 at 2012-08-13 19:36:57
请问您有做过上样缓冲液中不加DTT的SDS-PAGE么？影响很大吗？...

没有做过，都加了的。个人认为影响大小取决于你的蛋白样中具体所含二硫键多少，越多影响越大。

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10楼2012-10-07 21:18:20

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yingyangyang

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★ ★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-08-14 13:41:36

DTT是二硫苏糖醇，是一种强还原剂，作用类似于巯基乙醇。但是毒性比巯基乙醇低，但是价格贵。主要作用是防止DNA二聚化！

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2楼2012-08-13 17:15:19

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飘零的叶子

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引用回帖:

3楼: Originally posted by lou87 at 2012-08-13 17:52:47
是一种强还原剂，能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，而sds可以破坏蛋白质的二三级结构，二者使蛋白质呈线性，忽略电荷因素，其迁移率可看成与分子大小成正比。如果未加DTT，则蛋白质的线性多肽链未完全打开，其分子空间 ...

请问您有做过上样缓冲液中不加DTT的SDS-PAGE么？影响很大吗？

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4楼2012-08-13 19:36:57

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